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自发性高血压大鼠肥厚心肌和纤维化肾脏组织中microRNA-21的表达

吉娜  
【摘要】: 目的 心血管疾病在发达国家长期以来一直是主要的死因,而且正快速变为发展中国家的头号杀手。许多诸如高血压,缺血性心脏病,血管疾病,和内分泌紊乱的心血管疾病的常见的病理反应是心肌肥大。因此心肌肥大是心血管疾病致死率和病态的主要的一个决定因素。 心脏的病理过程和对心脏功能重要的基因的表达谱有关,MicroRNAs是最近发现的一类调控基因表达的内源性非编码的小RNAs.它们的生物重要性,起初在癌症,病毒疾病和发育过程被证实,最近在心血管生理和病理方面更多的被调查 在心脏方面,microRNAs单独或者联合的错误表达影响细胞结局,调节细胞增长和分化之间的平衡,并且诱导或者影响心脏疾病状态,诸如肥大,纤维化,电重塑和心律失常。 好几种MicroRNAs的上调或者下调与啮齿类和人类病理性的心脏重塑有关,其中miR-1,miR-195,miR-21,miR-133和心脏增长方面的作用有关。研究最热的是MiR-21。许多研究得出一致性的结果MiR-21在肥大心脏中的表达上调。 本研究应用病理切片染色、real-time PCR等技术观察SHR大鼠和Wistar大鼠心脏及肾脏组织中miR-21的表达情况,探讨miR-21在高血压致左室肥厚及肾脏纤维化中的作用。 方法 一、模型制备 选择10只11周龄雄性SPF级自发性高血压大鼠(SHR)作为实验组,年龄性别相配的10只SPF级Wistar大鼠为对照组。所有大鼠均适应性饲养一周,后实验组大鼠予以0.45%的氯化钠溶液饲养三周,对照组大鼠正常饮用自来水。所有大鼠均于饲养四周后处死。立即取肾脏及左室心肌组织于-80℃冻存备用。 二、心脏肥大和肾脏纤维化的评估 通过心脏大小的组织病理学的分析,左心室重量指数(LVMI)即左心室重与体重的比值(LVW:BW)来评估心肌肥大。通过组织病理学的分析来评估肾脏纤维化。 三、miRNA检测 1、提取miRNA 2、检测miRNA.溶液浓度和纯度(OD260/280)。 3、加Poly(A)尾 4、反转录 5、PCR反应 结果 1、心肌肥大和肾脏纤维化的鉴定 计算出两组左心室重量指数(LVMI),实验组LVMI高于对照组,差异有统计学意义。 所有实验动物均于15周龄时处死,同时病理检测其心肌组织及肾脏组织病理改变。光镜下可见,实验组左室心肌细胞明显肥大,左室心肌及肾脏近髓皮质部组织显著纤维化改变。对照组左室心肌细胞未见肥大的改变,心肌纤维化和肾脏纤维化程度较轻。 2、肥大心脏和纤维化肾脏microRNA-21的表达 实验组大鼠microRNA-21在左室心肌和肾脏近髓皮质部组织的表达均高于对照组,差异有统计学意义。 结论 在SHR大鼠肥大的左心室和纤维化的肾脏近髓皮质部组织中miR-21是相对高度表达的。miR-21可能参与了高血压致心肌肥厚及肾脏纤维化的病理过程。


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