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预构组织工程化颌下腺血管化的实验研究

李欣宇  
【摘要】: 目的 组织工程化颌下腺研究的最终目的是要将有生物活性的种子细胞与具有三维空间结构的可降解生物材料植入体内,使细胞继续增殖分化维持其功能,并最终形成具有特定结构和分泌功能的人造器官。由于血运的重建是组织再生的基础,要获得良好的新生组织工程化组织,必须保证植入体内的种子细胞尤其是材料内部的种子细胞能够获得及时充分的营养,这又有赖于充足的血液供应和细胞与材料复合物内血供重建的程度和速度。因此进行细胞和材料复合物体内血供的重建就成为组织工程由基础向临床应用的关键性环节。 本实验研究目的是采用组织工程技术将具有增殖和分化能力的颌下腺种子细胞与胶原海绵复合物植入动物体内培养,运用预构的方法培养组织工程复合物,观察血管化情况,探讨在同种异体动物体内构建具有生命活力的组织工程化颌下腺的可行性。 方法 取3天龄SD大鼠颌下腺,组织块法培养颌下腺细胞(RSGCs),并进行细胞来源鉴定。将细胞接种于明胶海绵支架中,体外培养72小时。实验组:预构带腹壁浅动静脉的筋膜瓣,包裹细胞明胶海绵支架复合物,对照组:复合物直接植入SD大鼠腹壁下。不同时间点(4d,7d,14d,21d)分别进行光镜、扫描电镜、血管墨汁灌注组织学及BrdU标记免疫组织化学染色等检测,并应用MetaMorph软件分析墨染区域面积占材料总面积的比例(Pr),SPSS 13.0对数据进行统计分析,观察颌下腺细胞与明胶海绵支架材料复合物在体内的生长及血管化情况。 结果 实验组植入物在第7-14天出现明显血管化,在海绵中存在大量墨汁染色颗粒及染色区,颌下腺细胞与海绵材料粘附生长,有功能性团块样结构出现,14-21天血管化稳定无明显变化。 结论 预构的方法可以为组织工程化颌下腺提供良好的血供,并为组织工程化颌下腺组织的血管化提供理论与实验依据。


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