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瘦素对人子宫内膜癌细胞雌激素原位合成的影响

王丽君  
【摘要】:目的 通过研究瘦素对子宫内膜癌(EC)细胞中芳香化酶mRNA及蛋白表达及原位雌激素合成的影响,探讨瘦素在子宫内膜癌发病机制中的作用。 方法 (1)通过原代培养获得子宫内膜癌间质细胞。(2)药物干预时,采用间质细胞与Ishikawa细胞共培养(合称为子宫内膜癌细胞)的模式。(3)在共培养的子宫内膜癌细胞中加入终浓度分别为0、50、100、150、200ng/mL的瘦素,继续培养48h,以只加PBS,继续培养0h者为对照, MTT法检测细胞的增殖率;100ng/mL组再加入1μM芳香化酶抑制剂来曲唑,再次检测细胞的增殖率。(4)RT-PCR法及免疫印迹法分别检测单独培养的间质细胞和Ishikawa细胞中芳香化酶mRNA及蛋白的表达量;在共培养细胞中加入终浓度为100ng/mL的瘦素,以只加PBS者为对照,继续培养48h,分别检测细胞中芳香化酶mRNA及蛋白的表达量(。5)在共培养的子宫内膜癌细胞中分别加入100ng/mL瘦素、100ng/mL瘦素+1μM来曲唑,以只加PBS者为对照,继续培养48h,放免法检测细胞培养液中雌二醇(E2)的浓度。 结果 (1)成功培养出子宫内膜癌间质细胞,并稳定传代。(2)MTT法显示:当瘦素终浓度低于100ng/mL时,子宫内膜癌细胞的增殖率随瘦素浓度的增加而增大,100ng/mL时最大,差异有统计学意义(P0.05);100、150、200ng/mL浓度组细胞增殖率差异无显著性;来曲唑可明显抑制100ng/mL瘦素组的细胞增殖率(P0.05)。(3)芳香化酶mRNA及蛋白在间质细胞和Ishikawa细胞中均有表达,间质细胞中的相对表达量显著高于Ishikawa,差异有统计学意义(P 0.01);经100ng/mL瘦素处理后,共培养的子宫内膜癌细胞中的芳香化酶mRNA及蛋白的相对表达量均明显增加(P0.01)。(4)100ng/mL瘦素组细胞培养液中的雌二醇浓度明显大于0ng/mL瘦素组(P0.01);100ng/mL瘦素+1μM来曲唑组培养液中的雌二醇浓度明显低于100ng/mL瘦素组(P0.01)。 结论 瘦素促进子宫内膜癌细胞增殖及细胞中芳香化酶的表达,并增加原位雌激素合成,来曲唑可抑制此作用。这可能是瘦素在子宫内膜癌发病机制中的作用。


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