摄入的乳酸杆菌能够防止小鼠肠道菌群失衡以及喜氧金黄色酿脓葡萄球菌和绿脓假单胞菌造成的感染

【摘要】：背景：在过去十年中,对于肠道微生物的研究越来越多。人类肠道中有大连微生物群,它们的平衡依赖于几个因素：胃的酸度,肠道蠕动、胆盐等。微生物失衡也能引起一些疾病的产生或使身体处于不正长的生理状态。抗生素能够使肠道菌群失衡,使机会致病菌增加,甚至移位到肠外组织。众所周知,金黄葡萄球菌和铜绿假单胞菌是条件致病菌,为医院感染病原菌。他们似乎有机会有能力促进肠道及呼吸道的感染。不管在社区感染或是医院感染中,他们引起的致病率和死亡率规模都是很大的。世界流行病中,囊性纤维化的病人最容易受到这些病原菌的侵袭,中从而引起的肺部感染。尽管抗生素的使用对于这些细菌的感染有一定的作用,但是大量药物使用的危害迫使人们为这些细菌感染的疾病寻求新的治疗方法。目前,乳酸菌和双歧杆菌由于其健康价值与营养价值的功效,因此把它们作为营养添加剂引起了广泛的兴趣。乳酸菌为益生菌已经被广泛接受。它能够抑制病原菌在机体中的定植,调节免疫系统,在维持肠道生态系统中也起着不可忽视的作用。有证据表明维持肠道菌群平衡能够抑制呼吸道及肠道中病原菌的侵染。目的：(1)探讨口服乳酸菌对于金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌引起的肺部感染的影响。(2)探讨乳酸菌及其细胞提取物对金黄葡萄球菌及铜绿假单胞菌感染肠上皮细胞的影响。(3)通过分子生物学技术证明抗生素与嗜酸乳酸菌对肠道微生态系统的影响。材料和方法：(1)对于肺部感染的研究：气我攻击法建立小鼠肺炎模型后连续7天口服乳酸菌,细菌学、病理学、血清细胞因子对肺组织进行评价。同时,人肺A549细胞被用来确定益生菌对肺部感染的作用。(2)对于肠道菌群的研究：收集小鼠粪便,进行DNA提取及PCR扩增,利用DGGE技术分析小鼠肠道菌群的结构。对粪便细菌进行计数,通过特殊引物进行PCR扩增,从而分析抗生素和益生菌在肠道菌群中的作用。(3)对于肠道上皮感染的研究：乳酸菌全细胞极其游离上清液被用来分析人癌LoVo细胞的影响,并用荧光显微镜观察。Bac细菌染色方法检测金黄葡萄球菌及铜绿假单胞菌侵染后乳酸菌的作用,并用流式细胞术分析。结果：抗生素干预后,金黄葡萄球菌及铜绿假单胞菌侵染小鼠肠道菌群中需氧菌数量减少。通过特殊引物进行PCR反应发现,与正常组相比,益生菌组和抗生素组肠杆菌的数量几乎相同,而双歧杆菌在益生菌组显著增加在抗生素组含量降低(P0.05)。在这项研究中,发现乳酸菌全细胞极其上清液能够显著抑制病原体所致肠感染的发生。这一结果背后的机制可能是干扰胞外聚合物与细胞表面疏水的无集落的形成。在口服乳杆菌组,肺部细菌数量减少(P0.05).在益生菌组中,感染引起的促炎因子的释放被抑制。嗜酸乳杆菌诱导了抗炎因子IL-10的释放。结论：利用阿奇霉素扰乱肠道微生物能够使宿主抗感染能力降低。目前工作表明,乳酸菌尤其是嗜酸乳杆菌的使用有助于恢复肠道菌群的平衡。嗜酸乳杆菌由于其对胆汁酸的耐受能力,在治疗肠道感染中是最常用的益生菌。本实验表明,嗜酸乳杆菌能够抑制由于金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌引起的肠和肺的毒性。其机制可能是通过干扰胞外聚合物与细胞表面疏水性,使病原体不能直接或间接的引起宿主免疫反应。