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表皮生长因子对豚鼠慢性鼓膜穿孔愈合的影响

卞英伟  
【摘要】:背景:鼓膜穿孔是一种常见临床体征,患者大约占人口的1%,慢性鼓膜穿孔一般需要行鼓膜修补术,成功率在90%左右,但是手术费用昂贵,具有风险,而在发展中国家许多基层医院技术还不成熟。开创一种微创的门诊治疗方式是必要的。近来的研究表明生长因子是门诊治疗慢性鼓膜穿孔一种有效的方式。表皮生长因子受体在许多动物的鼓膜中被发现,表皮生长因子调节细胞生长,它的作用在创伤领域已经被证实,近来在动物实验尤其是急性动物实验中被多次研究,但在慢性鼓膜穿孔中研究较少。 目的:建立豚鼠慢性鼓膜穿孔模型,评估表皮生长因子在促进慢性鼓膜穿孔中的作用。 方法:①建立豚鼠鼓膜慢性穿孔模型:豚鼠35 只,其中5 只为正常对照。所有动物先用腹腔氯胺酮麻醉(100mg/kg), 在手术显微镜下用灼热尖针在豚鼠双侧鼓膜切开相当于80%鼓膜紧张部面积的穿孔。在手术后4 周,对小于50%鼓膜面积的穿孔用灼热尖针再次扩大到80%,再过6 周后穿孔的大小在手术显微镜下评估,选取稳定慢性穿孔且超过50%鼓膜紧张部面积的44 耳。②实验方法:在手术显微镜下刮除穿孔鼓膜的边缘后,然后在鼓膜上放一块浸有重组人表皮生长因子的明胶海绵,左耳作为EGF 试验耳,右耳作为对照耳。试验耳滴入150 μL 的重组人表皮生长因子溶液,对照耳滴入等量的生理盐水,隔一天一次共5 次。在试验期间肌肉注射氨苄青霉素预防感染。10 天后观察鼓膜生长情况,记录,以后每周观察一次,电子内窥耳镜拍片。3 个月 后处死豚鼠,做组织学观察:手术显微镜下解剖颞骨,取出愈合鼓膜,石蜡包埋,切片,常规HE 染色,光镜检查。各组随机取8 张片,用组织学检查鼓膜厚度。愈合率采用卡方检验,愈合时间的比较采用对数秩检验,鼓膜厚度采用单因素方差分析。 结果: 1.首次手术后第10 周观察发现44 耳穿孔大小超过50%鼓膜面积,制作豚鼠鼓膜慢性穿孔模型成功率73.3%(44/60)。有一只豚鼠因为麻醉死亡,总共有16 耳因为感染以及愈合被剔除。 2.EGF 治疗组获得了76.2%(16/21)的愈合率,而对照组为21.7%(5/23),治疗组和对照组鼓膜愈合率差别显著(p 0.05),愈合时间缩短(P0.05)。 3.正常豚鼠鼓膜和人的鼓膜很相似,有3 层结构构成,即外上皮层、中纤维层及内黏膜层。靠近鼓环的厚度是鼓膜中层厚度的2 倍以上。rhEGF 治疗3 个月的鼓膜在组织结构和厚度上都与正常鼓膜很相似(P0.05),而对照愈合的鼓膜比正常鼓膜和治疗组愈合鼓膜都要薄些(P0.05)。“薄”是由于中间纤维层的缺乏,这种鼓膜只有两层结构。 结论: 1.豚鼠慢性鼓膜穿孔模型制作简单,方法可靠,是研究人类鼓膜穿孔的理想动物模型。 2.EGF 可以促进豚鼠慢性鼓膜穿孔提高治愈率,减轻疤痕且无明显毒副作用。 3.鼓膜是EGF 的靶组织,EGF 治疗后愈合鼓膜与正常鼓膜相似。


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