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三七总皂甙逆转乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM耐药的实验研究

刘丽丽  
【摘要】: 目的:化疗在乳腺癌综合治疗中占有非常重要地位,但由于耐药的发生,影响了化疗效果,甚至导致化疗失败,影响病人预后。因此,寻找耐药逆转剂、提高化疗疗效是肿瘤临床急需解决的问题。目前有关逆转耐药的研究比较多,现已被证实具有逆转耐药活性的药物有钙通道阻滞剂、免疫调节剂、钙调蛋白拮抗剂等,因疗效欠佳、作用靶点单一、毒副作用大等难以应用于临床。中药因具有疗效确切、多靶点、毒副作用小等优点,具有很大的研究价值,所以从中药中寻找安全有效的耐药逆转剂是当今研究的热点。中药三七总皂甙具有钙通道阻滞的活性,以往对三七的研究主要是作为抗凝剂治疗心脑血管疾病,本实验主要研究三七总皂甙(PNS)是否具有逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADM(耐药细胞)耐药的作用。 方法:以四唑盐比色法(MTT)测定三七总皂甙对MCF-7/S(敏感细胞)及MCF-7/ADM(耐药细胞)的直接细胞毒作用;并用此法测定阿霉素(ADM)对两种细胞的毒性作用,并计算出半数致死量(IC50)和耐药倍数;以无细胞毒性浓度的三七总皂甙作为耐药逆转剂,用MTT法体外药敏感实验观察其对乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM的逆转作用;用RT-PCR法分别测敏感细胞和三七总皂甙作用后的耐药细胞表达的多药耐药基因MDR1的阳性率;用WESTERN(蛋白印记)法测定敏感细胞和三七总皂甙作用后的耐药细胞表达多药耐药蛋白P - gp的阳性率。 结果: 1、三七总皂甙在200ug/ml浓度以下时对两细胞基本无毒性,为安全有效的逆转剂量。2、阿霉素敏感细胞和耐药细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(0.62±0.03)ug/ml和(25.03±5.37)ug/ml ,耐药倍数约为40.37倍。3、三七总皂甙能够增强阿霉素(ADM)对MCF-7/ADM的细胞毒作用,三七总皂甙50、100、200ug/ ml分别作用于乳腺癌耐药细胞48h后,耐药细胞株的IC50由原来的(25.03±5.37)ug/ml分别降至(17.87±4.27)ug/ml、(13.90±4.63)ug/ml、(11.91±4.69)ug/ml。4、三七总皂甙(50、100、200ug/ ml)均可下调多药耐药基因MDR - 1及其表达的耐药蛋白P - gp的量,且随三七总皂甙浓度的增加,下调作用更加明显。 结论: 1.三七总皂甙对乳腺癌细胞MCF-7/ADM耐药性有一定逆转作用。 2.机制为下调多药耐药基因MDR1及耐药蛋白P-GP的量,与传统的钙通道阻滞剂有一定不同之处。


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