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定量PCR检测正畸治疗前后牙龈卟啉单胞菌的变化

陆卉  
【摘要】: 目的:错牙合畸形是常见的口腔颌面部疾病之一,患病率从28%-90%不等。根据临床观察和文献报道,固定矫治器戴入后患者常出现龈炎,牙龈肿胀等牙周疾病,并且儿童和成人戴入固定矫治器后牙周的变化并不完全相同。所以了解错牙合畸形患者的牙周和龈下微生物状况,可为临床预防和治疗固定矫治过程中可能出现的牙周疾病提供理论依据。本实验目的一:比较固定矫治器戴入后牙周临床指标和龈下牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)的动态变化。目的二:比较成人和儿童戴入固定矫治器前后牙周临床指标和龈下P.gingivalis变化的异同。 材料和方法:随机抽取在大连医科大学附属第一医院就诊的正畸初诊患者28名,其中18-25岁成人11名,12-15岁儿童17名。所有病例采用直丝弓矫治技术进行矫治。选择两个下颌中切牙作为观察牙位,为每个患者建立牙周状况病志,在戴矫治器前和之后第一个月、第三个月由同一位临床医生用一个带标记的牙周探针分别检查牙周各项指标,包括:菌斑指数(PLI)、龈沟出血指数(SBI)、探诊深度(PD)和附着丧失(AL)。同时对龈下菌斑进行取样。龈下微生物样本从粘托槽前后的下切牙唇侧龈下近远中颊轴角取得。集齐样本后集中提取菌斑DNA,常规酚氯仿抽提法提取DNA,-20度冻存待检。之后采用Taqman探针荧光实时定量PCR(real-time PCR)技术对样品DNA进行检测,可以得出每个样品中P.gingivalis和总细菌的数量,从而可以得到P.gingivalis在不同样本群中的检出率和P.gingivalis占总细菌比例的变化。 结果: 1.微生物指标:P.gingivalis检出率在儿童和总体三次检测中均持续上升,但不显著。成人,儿童和总体P.gingivalis百分含量均持续升高。其中总体样本P.gingivalis百分含量从基线到第三个月升高有显著性,并且在基线和第一个月时,成人显著大于儿童。 2.临床指标:成人、儿童和总体样本的PLI和SBI在前两次检测中均持续显著升高。PD先升高后下降,且在所有检测中未发现有大于2mm的龈沟,所有病例未发现附着丧失。在基线处,成人PLI大于儿童,成人探诊深度小于儿童。 结论: 固定矫治器可促进P.gingivalis在儿童龈下的定植,并可引发其百分含量升高,导致致病作用增强。固定矫治器还可导致局部菌斑堆积,引发轻度牙龈炎症。正畸患者部分牙周微生物指标和临床指标有相似变化趋势。P.gingivalis占总菌群的百分含量与菌斑指数呈现同步逐渐上升的趋势。并且,固定矫治器对成人和儿童牙周的影响不同,对儿童的影响更加显著。固定矫治器对牙周微生态和临床状态影响在短期内还没有明显超出健康范围,也未发现附着丧失等牙周炎病变。长期佩戴固定矫治器可能导致的牙周变化还有必要进一步研究确定。最后,利用荧光实时定量PCR法检测正畸患者龈下菌斑中P.gingivalis及其占总菌群的百分比是快捷且准确的。


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