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MG132调控Nrf2/Keap1-ARE通路对肠缺血再灌注肝损伤的影响

沈刚  
【摘要】: 目的:研究MG132对大鼠肠缺血再灌注(Intestinal ischemia reperfusion,Intestinal IR)肝损伤的影响及Nrf2的作用。 方法:32只雄性SD大鼠随机分为对照组、IR组、对照+MG132预处理组、IR+MG132预处理组,通过夹闭肠系膜上动脉(SMA)1小时、再灌注2小时,建立肠IR损伤模型。预处理组于缺血前30分钟分别以0.5 mg/kgMG132行腹腔注射,对照组仅进行剖腹术及SMA分离术。再灌注结束后,腹主动脉取血并留取肝肠组织。观察大鼠肠、肝组织形态学改变,检测血清中ALT、AST、LDH、IL-6、TNF-α和26S蛋白酶体水平,测定肝组织匀浆超氧化物岐化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)活性,采用免疫组化法和Western-blot法检测肝组织中Nrf2和HO-1的表达。 结果:1.与对照组相比,IR组:(1)肝、肠组织有明显的水肿、渗出和炎性细胞浸润(P0.01、P0.01);(2)肝组织SOD活性降低(P0.01),MPO活性增强(P0.01):(3)血清TNF-α、IL-6、ALT、AST和LDH水平均显著升高(P0.01、P0.01、P0.01、P0.01、P0.01):(4)血清26S蛋白酶体水平无明显变化(P0.05);(5)肝组织Nrf2、HO-1表达增强(P0.01、P0.01)。2.与对照组相比,对照+MG132预处理组:(1)肝组织清除ROS的能力如SOD活性增强(P0.05);(2)血清26S蛋白酶体水平下降(P0.05);(3)肝组织中Nrf2和HO-1蛋白表达增多(P0.01、P0.01)。3.与IR组相比,IR+MG132预处理组:(1)肝、肠组织的病理表现及损伤程度明显减轻(P0.01、P0.01):(2)肝组织SOD活性升高(P0.01),MPO活性降低(P0.05);(3)血清TNF-α、IL-6、ALT、AST和LDH水平降低(P0.01、P0.05、P0.01、P0.05、P0.05);(4)血清26S蛋白酶体活性降低(P0.01);(5)肝组织Nrf2、HO-1表达增强(P0.01、P0.01)。 结论: (1)大鼠小肠缺血再灌注可引起严重的肝损伤; (2)MG132预处理对肠IR所致肝损伤有明显的保护作用,这种保护作用与Nrf2和HO-1的激活有关,MG132亦可通过抑制蛋白酶体活性,增加Ⅱ相酶和抗氧化酶的含量。


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