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灌服pH智能化去氨微乳凝胶防治大鼠肝性脑病的实验研究

张春乐  
【摘要】: 目的:前期实验已证实去氨微乳(microemulsion for removal of ammonia, ME-RA)能有效清除人工结肠液中的氨,但其在胃肠道不稳定,且影响胃肠道环境,故在此基础上制备了pH智能化去氨微乳凝胶(microemulsion-based gels for removal of ammonia, MBGs-RA),提高了胃肠道稳定性,减少了对胃肠道的影响。本实验在建立肝性脑病(hepatic encephalopathy, HE)大鼠模型基础上,进一步阐述其降肠道氨、血氨进而防治HE的作用。 方法 1.以span80、tween80等为表面活性剂,乙二醇为助表面活性剂,以二甲基硅油为外油相,内相为5%的食用白醋,并加入智能化高分子材料海藻酸钠MBGs-RA。 2.取大鼠80只,随机分为8组:正常对照组、空白对照组、模型组、高、中、低剂量MBGs-RA组、食醋对照组、乳果糖对照组。 3.利用硫代乙酰胺(thioacetamide, TAA) 350mg/kg连续3日腹腔注射建立HE大鼠模型。 4.TAA造模前2小时灌胃给药:高、中、低剂量MBGs-RA组分别予MBGs-RA 15ml/kg、10ml/kg、5ml/kg,空白对照组予同剂量空白微乳凝胶,乳果糖对照组予同剂量乳果糖,正常对照组和模型组予等体积生理盐水,食醋对照组给予23.1%等体积的食醋溶液,首次给药后,每隔24小时给药1次,共给药4次。 5.在实验的第4天利用生物机能实验系统测定全部实验大鼠脑电图,观察MBGs-RA对HE大鼠脑电图的影响。 6.测定脑电图之后,取大鼠内眦血使用ALT和TBiL试剂盒检测肝功能变化,下腔静脉采血检测血氨,观察MBGs-RA对HE大鼠血氨的影响,大鼠处死前,取结肠段称重,生理盐水处理后,测量各组大鼠肠道氨水平,血氨和肠道氨由强生Vltros350全自动干生化分析仪测定。 7.制备肝脏病理切片进行组间比较。 结果 1.各组大鼠行为学比较 与正常组相比,空白组未见异常表现,模型组大鼠出现精神萎靡,活动减少,反应迟钝,嗜睡等表现,其中睡眠时间延长(P0.05),进食量、体重下降(P0.05),HE分级评分升高(P0.05);与模型组相比,高、中、低剂量组、食醋组、乳果糖等治疗组上述表现不同程度减轻,睡眠时间、进食量、体重下降、HE分级评分均有所恢复(P0.05),高、中剂量组优于其它治疗组(P0.05);除进食量与给药剂量无相关性外,睡眠时间、体重变化、HE分级评分与给药剂量呈负相关。 2.各组大鼠脑电图的比较 正常组和空白组脑电图未见异常,以α波为主,频率8~13次/s,电压50~100μV;模型组明显异常,以广泛性的宽大的6波为主,频率5~7次/s,电压160~280μV;中、高剂量组脑电图轻中度异常,表现为α波节律慢性化,夹有较多θ波,频率多在8-11次/分,电压150~250μV;低剂量组、食醋组、乳果糖组脑电图中度异常,以θ波为主,频率7-9次/分,电压130~200μV。 3.各组大鼠血氨、肠道氨的比较 与正常组相比,空白组大鼠血氨、肠道氨无差异(P0.05),模型组和各治疗组上述指标均升高(P0.05);与模型组相比,各治疗组血氨、肠道氨均有所下降(P0.05),其中高、中剂量组效果优于低剂量组、食醋组、乳果糖组(P0.05),低剂量组、食醋组、乳果糖组之间无差异(P0.05);剂量组间与血氨、肠道氨变化呈负相关(P0.05)。 4.各组大鼠生化肝功(ALT、TBIL)和肝脏病理的比较 与正常组相比,空白组大鼠ALT、TBIL和肝脏病理无差异(P0.05),模型组和各治疗组三者均有差异(P0.05);与模型组相比,各治疗组中除食醋组TBIL无差异(P0.05),其它组上述指标均有差异(P0.05),其中高、中剂量组三者均优于低剂量组、食醋组、乳果糖组(P0.05),低剂量组、食醋组、乳果糖组之间无差异(P0.05);剂量组间与ALT、TBIL值变化呈负相关(P0.05)。 结论 1.pH智能化去氨微乳凝胶可降低肠道氨、血氨,改善大鼠肝功能以及行为学、脑电图。 2.该去氨微乳凝胶改善肝性脑病的作用以高、中剂量组疗效明显,优于乳果糖及食醋对照组。


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