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中药鸦胆子油静脉乳剂对卵巢癌细胞株CAOV3作用的实验研究

孙忠慧  
【摘要】: 现代医学目前认为肿瘤的发生是由多基因相互协同作用的癌变过程。在肿瘤研究领域,细胞过度增殖和分化异常是许多年来肿瘤学家们一直观注的焦点。细胞凋亡概念的引入,为推动原有研究的进展,开辟了广阔的前景。细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡(progremmed cell death PCD),由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序,由基因编程控制的,经多种信号传递的细胞主动“自杀”过程。对生物体维持发育器官的形状,调整细胞数目,除去多余或有害细胞(如自身免疫细胞、病毒感染细胞、肿瘤细胞等),保持机体正常状态具有积极的生物学意义。凋亡过程紊乱会给人类带来许多严重的疾病。癌细胞由于丧失了自发凋亡反应能力而得以持续存活。卵巢癌的发生可能与细胞凋亡不足相关。 卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤,占第三位。其发病率逐年增高,病死率已居首位。由于癌细胞生长迅速,侵袭和转移发生早,生物学行为恶劣,70%的卵巢癌诊断时已为晚期。在治疗方面,虽通过手术、化疗、放疗可以取得一定疗效,但效果仍不另人满意。因此,中医药治疗在临床实践中日益显示出优势。抗肿瘤治疗的有效性依赖于肿瘤细胞对程序性死亡的反应性,积极寻找特异性诱导卵巢癌细胞凋亡的药物(中药)具有重要的理论和实际意义。 鸦乳剂具有抗肿瘤作用,对胃肠道肿瘤、脑肿瘤、肺癌等有较好疗效,而对卵巢癌光-电镜形态学、酶活性改变及诱导细胞凋亡未见报导。本实验应用光镜-酶细胞化学染色法,电镜技术,与顺铂比较,观察中药鸦乳剂对卵巢癌细胞株CAOV3作用。鸦乳剂浓度0.5mg/ml,CAOV3细胞接种培养,贴壁生长状态良好,调节单细胞悬液浓度为1.1×10~5个/ml。应用光镜-酶细胞化学染色法观察的细胞原位接种于内置载片的培养皿中,用于电镜观察的细胞接种于2只培养瓶中。48h施加处理因素。结果:正常细胞呈长梭形,核圆居中,染色质均匀,胞质清亮透明;施加因素组24h部分细胞失去其正常生长形态,由长梭形变成圆形;细胞胞浆中出现细小空泡,核染色质浓密。48h见圆形细胞相对增多,胞浆空泡化严重,表现为空泡变大,数量增多。光镜-酶细胞化学染色标本,质膜标志酶Mg~(2+)-ATPase,内质网标志酶G-6-Pase酶反应颗粒变小,数量减少,密度减低,酶活性下降。经Ridit统计分析,与正常组比较,P<0.05,差异性显著。电镜下,中药组细胞变圆,表面微绒毛、突起明显减少,伪足消失,胞浆浓缩,细胞内出现大小不等的空泡,泡内容物与基质电子密度相似,部分线粒体肿胀、空泡化,可见凋亡小体,呈现出细胞凋亡的特征。 结论:鸦乳剂促进卵巢癌细胞形态学改变,诱导癌细胞凋亡,降低Mg~(2+)-ATPase和G-6-Pase的酶活性,降低癌细胞侵袭和转移能力。


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