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中药复方冠心康对LOX-1及NF-Kb致兔AS机理的影响的研究

许斌  
【摘要】:目的:通过建立兔HLP模型,观察HLP对血浆tHcy浓度、NF-kB和LOX-1表达的影响及其与AS发病的关系,并探讨中药冠心康对高脂饮食所诱导的HLP和AS粥样化病变的拮抗效应,从而寻求内皮功能障碍和早期粥样化病变的有效干预方法。 方法:通过高脂饮食建立兔高脂血症和动脉粥样硬化模型,观察冠心康颗粒剂对动脉粥样硬化模型兔主动脉粥样硬化病变及血脂、组织细胞中LOX-1表达水平的影响。实验选用雄性新西兰白兔24只,随机分为:A(对照组)8只,饲以普通饲料100g/d;B(高脂组))8只,饲以高脂饲料(普通饲料+1%胆固醇+6%花生油)100g/d;C(冠心康组)8只,饲以高脂饲料100g/d+冠心康粉剂1.45g/kg/d,蒸馏水稀释。各组分别于第0、4周空腹取静脉血3ml,分离血清,应用酶法在全自动生化分析仪上测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。取抗凝血5ml,分离血浆用循环酶法检测血浆中同型半胱氨酸的含量,分离单核细胞,-80℃冻存,待检LOX-1。8周末取血后处死动物,分离升主动脉至腹主动脉段。升主动脉和主动脉弓用于RT-PCR法检测动脉LOX-1、NF-κB mRNA的表达:胸主动脉头段1cm置4%多聚甲醛固定,用于免疫组化检测NF-κB、LOX-1蛋白表达及HE染色。余下的血管条10%中性甲醛固定24小时后置于Herxheimers液分析斑块面积。 结果:模型组血脂水平、血浆中同型半胱氨酸浓度、主动脉NF-κB、LOX-1mRNA表达显著高于正常对照组(p<0.05),主动脉切片发现动脉内膜不连续,部分剥脱,平滑肌细胞排列疏松、紊乱,主动脉壁均见到程度不同的脂质浸润,其病变弥漫,泡沫细胞较多,可见斑块突出管腔。免疫组化示主动脉内皮细胞NF-κB、LOX-1表达增强。治疗组血脂水平、血浆中同型半胱氨酸含量、主动脉NF-κB、LOX-1 mRNA表达显著低于模型组(p<0.05),主动脉病理形态学和免疫组织化学检测示病变轻于模型组,主动脉内皮细胞NF-κB、LOX-1mRNA表达减弱(p<0.05)。 结论:(1)HLP可升高血中同型半胱氨酸浓度,促进AS斑块的形成和NF-κB、LOX-1mRNA的高表达。(2)冠心康能明显降低血浆同型半胱氨酸血症,改善脂质代谢紊乱和减小AS斑块的面积,减轻内膜增生程度,具有抗AS的作用。


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