绞股蓝抗皮肤光老化的实验研究

【摘要】：目的：本项研究依据中医药基础理论，运用生化分析法及分子生物学方法，观察紫外线照射引起的无毛小鼠皮肤光老化模型皮肤组织中线粒体DNA片段缺失、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)的活性，丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_2O_2)含量及其皮肤组织结构及羟脯氨酸(HYP)含量的变化以及中药绞股蓝的干预作用及作用机制。 材料与方法：将昆明种无毛小鼠随机分成8组：正常对照组(A)、模型对照组(B)、外用绞股蓝低剂量组(C)、外用绞股蓝中剂量组(D)、外用绞股蓝高剂量组(E)、灌胃绞股蓝低剂量组(F)、灌胃绞股蓝中剂量组(G)、灌胃绞股蓝高剂量组(H)。模拟日光中UV长期照射，造成皮肤光老化模型。照射同时，给药组外用或灌胃绞股蓝。HE染色，40倍光镜下观察皮肤组织结构改变，并以生化分析方法测定SOD、CAT、GSH-PX活性，MDA、H_2O_2、HYP含量；运用PCR法测定皮肤组织中mtDNA(3867bp)片段缺失情况。结果：模型组无毛小鼠皮肤组织SOD、GSH-PX、CAT活性明显降低，MDA、H_2O_2含量显著增加(P＜0.05)；HYP含量明显减少；组织病理切片呈现光老化状态。与模型组比较，外用及灌胃绞股蓝中剂量组CAT活性明显改善(P＜0.05)；灌胃绞股蓝低剂量组、外用绞股蓝中剂量以及二者的高剂量组均可提高GSH-PX活性，降低H_2O_2含量；所有给药组皮肤组织中MDA含量均有不同程度的下降，且均具有显著性差异；外用及灌胃绞股蓝低、中剂量组的皮肤组织中SOD活力增高且具有显著差异(分别是P＜0.01、P＜0.05)；外用绞股蓝低剂量组、外用及灌胃绞股蓝中、高剂量组的皮肤组织中HYP含量均有明显增高。PCR法检测结果显示，所有模型组小鼠皮肤组织中均存在mtDNA(3867bp)大片段缺失，而正常对照组以及给药组中中、高剂量组小鼠皮肤组织中mtDNA(3867bp)大片段缺失的发生率和缺失占总mtDNA的百分比均显著低于模型组。结论：利用紫外线照射成功模拟了皮肤光老化动物模型。紫外线造成的无毛小鼠光老化皮肤组织具有明显的氧化损伤，皮肤组织中mtDNA发生大片段缺失，中药绞股蓝可通过清除自由基，提高机体抗氧化能力，减轻无毛小鼠皮肤组织氧化损伤，减少其组织中mtDNA片段缺失的形成，维护mtDNA活性，防止其代谢能力下降，从而延缓或防治无毛小鼠皮肤光老化的作用。另外绞股蓝还可能是通过提高皮肤中羟脯氨酸的含量来延缓皮肤光老化动物模型皮肤衰老。