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独活干预血管性痴呆模型大鼠自由基和免疫炎性损伤的实验研究

翁姣  
【摘要】: 血管性痴呆(vascular dementia, VD)是指由于缺血性、出血性的脑血管疾病和心血管病变引起脑部功能异常,进而产生的获得性智能损害综合征,尤以记忆丧失、高级认知功能减退为主,表现为一种慢性进行性疾病。近年来,学术界越来越重视免疫炎性损伤假说和自由基损伤假说在本病的病理机制中的作用。中医界多认为本病病位在脑,与肾关系密切,病性属本虚标实,本虚指阴阳气血的不足,标实指湿邪、痰浊、瘀血滞留体内。本研究是以独活为入手点,采用尼莫地平为对照,探讨独活在抑制血管性痴呆(VD)免疫炎性损伤和自由基损伤中的作用。 目的: 本实验研究旨在探讨独活在干预血管性痴呆模型大鼠免疫炎性损伤和氧化损伤中的作用,主要观察独活对模型大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响,探讨独活延缓脑老化的作用机制,为脑老化的机理研究及运用中药治疗血管性痴呆提供科学的实验依据。 材料与方法: 采用双侧颈总动脉持久结扎的方法(2-VO)塑造慢性脑灌注不足的血管性痴呆模型。分别给予中药独活、西药尼莫地平、生理盐水灌胃干预。四周后,进行水迷宫实验观察药物对血管性痴呆模型大鼠学习、记忆水平的影响。并以光镜观察模型大鼠海马CA1区的形态学改变;采用免疫组化的方法,测得各组大鼠海马CA1区TNF-α的表达差异;采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA法),检测各组大鼠血清中TNF-α、SOD、MDA的表达差异。 结果: 1.在水迷宫实验中,给药后的中药实验组和西药对照组与给药前比较,逃避潜伏期明显缩短(P0.01),说明独活和尼莫地平对双侧颈总动脉持久结扎VD模型大鼠的学习、记忆水平有提高作用。 2.TNF-α的ELISA检测结果:与空白对照组和假手术组比较,模型对照组、中药实验组、西药对照组TNF-α的表达均有明显提高(P0.01);与模型对照组比较,中药实验组、西药对照组TNF-α的表达均有所下降(P0.05);空白对照组与假手术组之间,中药实验组与西药对照组之间无统计学差异。 3.TNF-α免疫组化的检测结果:与空白对照组和假手术组比较,模型对照组、中药实验组、西药对照组阳性细胞的表达均有明显提高(P0.01);与模型对照组比较,中药实验组、西药对照组阳性细胞的表达均有明显下降(P0.01);空白对照组与假手术组之间,中药实验组与西药对照组之间无统计学差异。 4.SOD、MDA的检测结果:与空白对照组和假手术组比较,模型对照组、中药实验组、西药对照组SOD的表达均有明显下降(P0.01), MDA的表达均有明显上升(P0.01);与模型对照组比较,中药实验组、西药对照组SOD的表达均有所上升(西药对照组P0.01,中药实验组P0.05),中药实验组、西药对照组MDA的表达均有所下降(西药对照组P0.01,中药实验组P0.05);空白对照组与假手术组之间,中药实验组与西药对照组之间无统计学差异。 结论: 1.选用双侧颈总动脉持久结扎方法建造慢性脑组织灌注不足的血管性痴呆的大鼠模型。造模之后的模型对照组大鼠、中药实验组大鼠、西药对照组大鼠经水迷宫测试后逃避潜伏期明显延长,并且其学习、记忆能力降低,这三组大鼠血清中的TNF-α、MDA表达明显增高,SOD的活性显著下降,而且大鼠海马CA1区TNF-α阳性细胞的表达也明显增加,这些可能是VD的病理表现。 2.独活可以显著提高中药实验组大鼠的学习、记忆能力;抑制中药实验组大鼠血清中TNF-α、MDA的表达,提高SOD的活性;抑制中药实验组大鼠海马CA1区TNF-α的表达,因此,提示独活能抑制血管性痴呆模型大鼠的自由基和免疫炎性损伤,这些可能是独活防治VD的机制。


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