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银杏树内生真菌代谢产物中活性成分的研究

易大为  
【摘要】: 内生真菌长期生活在植物组织内部,与宿主协同进化,在演化过程中二者形成了互惠共生的关系,在宿主的生长发育和系统演化过程中起重要作用。内生真菌可产生一些重要的治疗人类疾病的药物,对内生真菌次级代谢产物的研究,可以筛选得到一些结构新颖、活性专一的物质。本文以银杏树内生真菌(Endophytic fungus of Ginkgo biloba L., EG)为研究对象,通过对内生真菌胞内产物的研究,定向筛选银杏内酯产生菌。 首先,从原始菌种EG_3出发,在筛选过程中分离得到菌株G_(3-1)、G_(3a)、G_(3b)、G_(AR)、G_(AY)、F_(1-3)和F_3,其中菌株G_(3b)、G_(AR)、G_(AY)、F_(1-3)和F_3经菌种鉴定,被归属为半知菌亚门、丝孢纲、瘤座孢目、瘤座孢科、镰孢菌属(fusarium)。 应用高效液相色谱法和电喷雾质谱法以及液相质谱联用技术,以银杏内酯标准品为对照,对G_3系列菌株的胞内产物进行了筛选和检测。由检测结果初步认定,菌株G_(3b)和F_3的代谢产物中含有银杏内酯A、银杏内酯B和白果内酯。 在菌株F_(1-3)的发酵液中,检测到有抗革兰阳性菌的物质存在,通过对活性成分的追踪,分离得到化合物F1-3A和F1-3B。经过质谱、~1H谱、~(13)C谱以及二维核磁共振波谱的测定和解析,确定化合物F1-3A的分子结构为: cyclo[Hiv-Me-Val-Hiv-Me-Val-Hiv-Me-Val];质谱、~1H谱及~(13)C谱的数据与环肽类抗生素Enniatin B的文献值基本一致,认定二者同质。经过质谱测定和解析,化合物F1-3B可能与Enniatin B_1或Enniatin D同质。


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