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心舒口服液的高效毛细管电泳质量控制方法及药效学研究

孙沂  
【摘要】: 心舒口服液由当归、川芎、红花3味药材经提取加工制成,主要用于治疗冠心病、心绞痛、动脉硬化症及血液高粘滞症。本论文以其为研究对象,建立了当归、川芎、红花药材及心舒口服液制剂的高效毛细管电泳质量控制方法,并对心舒口服液进行了药效学研究,为阐明其作用机理提供了实验依据。 首先,对当归药材进行了质量控制方法的研究。以阿魏酸、腺苷的提取效率及电泳图中峰数目的多少为指标,对样品制备方法进行评估。采用正交试验设计,对乙醇浓度、溶剂用量、提取时间3因素进行优化,确定最佳提取工艺为用10倍量的60%乙醇超声提取20 min,共提取3次。在此基础上建立了当归中阿魏酸、腺苷的定量分析方法。以10批甘肃岷县当归药材为样品建立了标准指纹图谱,确定共有峰24个,并与11个产地当归样品的指纹图谱进行比较,除宁夏、青海当归样品外,其它产地当归样品指纹图谱与标准指纹图谱具有良好的相似性(相似度大于0.9),并采用指纹图谱的方法鉴别了当归正品、代用品以及其它8种伞形科药材。此外,还建立了当归的CE-MS指纹图谱,为更准确、全面地评价当归的质量提供了科学依据。 其次,对川芎药材进行了质量控制方法的研究。以阿魏酸、腺苷的提取效率及电泳图中峰数目的多少为指标,采用正交试验设计,对乙醇浓度、溶剂用量、提取时间3因素进行优化,确定最佳提取工艺为用10倍量的60%乙醇超声提取20 min,共提取3次。在此基础上建立了川芎中阿魏酸、腺苷的定量分析方法。以10批四川灌县川芎药材为样品建立了标准指纹图谱,确定共有峰17个,并与11个产地川芎样品的指纹图谱进行比较,除浙江、云南川芎样品外,其它产地川芎样品指纹图谱与标准指纹图谱具有良好的相似性。采用指纹图谱的方法鉴别了川芎正品以及其它8种伞形科药材。此外,还建立了川芎的CE-MS指纹图谱,为更准确、全面地评价川芎的质量提供了依据。 第三,对红花药材进行了质量控制方法的研究。以芦丁、槲皮素、腺苷 沈阳药科人学博十学位论文 摘要 的提取效率及电泳图中峰数目的多少为指标,采用正交试验设计,对提取溶剂 浓度、用量、提取时间3因素进行优化,确定最佳提取工艺为用12倍量的60% 乙醇超声提取30 min,共3次。在此基础上建立了红花中芦丁、棚皮素、腺昔 的定量分析方法。以10批河南封丘红花药材为样品建立了标准指纹图谱,确 定共有峰29个,并与10个产地样品的指纹图谱进行比较,各产地红花样品指 纹图谱与标准指纹图谱具有良好的相似性。采用指纹图谱的方法鉴别了红花正 品、代用品、伪品。此外,运用血清药理学方法研究了红花对豚鼠离体心脏的作 用,以及对家兔血小板聚集性的影响。以红花醇提物灌胃给予家兔,取血分离得 到的血清能显著增加豚鼠离体心脏冠脉流量,增强心搏幅度及减慢心率(尸0.05 或尸0.01)。红花高、中剂量能明显抑制二磷酸腺昔诱导的家兔血小板聚集, 与生理盐水组相比有显著性差异(尸0.05或尸0.01)。根据血清药理学实验结 果,建立了血清指纹谱,与空白血清相比,含药血清指纹谱中出现了一些新的峰, 提示服药后血中存在着动态产生的成分可能是红花产生药效的原因。 第四,对心舒口服液进行了质量控制方法的研究。建立了口服液中阿魏 酸、芦丁、腺昔的定量分析方法,为评价心舒口服液质量提供了一个定量依据。 以10批心舒口服液为样品建立了标准指纹图谱,确认共有指纹峰27个,并与单 味药材水煎液、各药材阴性对照液的指纹图谱进行比较,确定了制剂与原料药材 指纹图谱之间的相关性,建立了复方中药制剂的质量控制方法。 最后,对心舒口服液进行了抗心肌缺血、抗血小板聚集的药效学研究。结 果表明,心舒口服液能明显减轻心肌缺血程度及心肌缺血范围;显著抑制心肌缺 血及心肌梗塞引起的血清肌酸磷酸激酶(cPK)活性升高,并对乳酸脱氢酶(LDH) 的释放有抑制作用:有效降低低切率下的血液粘度,抑制血小板粘附性和聚集性, 改善血液流变性。心舒口服液可增加冠脉血流量,改善心肌收缩功能,加强心肌 作功能力,表现出正性肌力作用,而不增加心肌耗氧量。心舒口服液对垂体后叶 素所致冠脉痉挛、冠脉流量减少有明显的保护作用,对心肌收缩幅度有一定抑制 作用,并明显增加心肌组织超氧化歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA) 含量。此外,心舒口服液具有抑制血小板聚集的作用。综上所述,心舒口服液具 有较强的抗心肌缺血、心肌梗塞以及抗血小板聚集的作用,本研究为其治疗心血 管疾病提供了科学依据。 沈阳药科大学博士学位论文 摘要 本论文首次对毛细管电泳在当归、川芍、红花及其复方制剂质量控制中的应 用展开了深入、系统的研究,为这一技术用于中药质量评价作了有意义的探索。 当归、川芍的CE一DAD一MS多维化学指纹图谱的建立,为最终建立其多维多息指 纹图谱奠定了基础。红花的血清药理学研究以及血清指纹图谱的建立,为实现中 药化学指纹图谱向中药药效组分指纹图谱的转化,开展中药指纹图谱组效学研究 提供了思路。 总之,本研究将中药学、分析化学、药理学、化学统计学和


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