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不同基原蟾酥类的HPLC指纹图谱研究

张屏  
【摘要】:蟾酥为蟾蜍属动物中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍的耳后腺及皮肤腺分泌物的干燥品,作为强心、升压、麻醉、抗肿瘤用药,广泛应用于亚洲地区。我国蟾酥药源丰富,除药典规定的两个品种外,尚有花背蟾蜍和华西大蟾蜍也用来采集蟾酥。蟾酥价格昂贵,掺假较普遍。品种混杂和掺假现象给蟾酥药材及其制剂的质量控制带来难题。 本文采用指纹图谱分析、化学成分分离鉴定、动物样品收集和品种鉴定相结合的方法,对蟾酥药材进行了科学、规范的质量控制标准的研究。 主要研究内容和结果如下: 1.详细综述了蟾酥类药物的化学成分、药理作用和质量标准化研究现状。 2.运用HPLC技术,优化色谱条件,同时测定蟾酥类药物中主要生物活性成分——蟾毒配基和蟾毒色胺类化合物。该方法可同时测定11个蟾毒配基和4个蟾毒色胺,具有良好的线性、重现性和精密度,可用于蟾酥类药物的质量评价。其中蟾毒色胺类成分的HPLC测定方法为首次建立,为蟾酥水溶物制剂提供了简便准确的分析测定方法。 3.对蟾酥类药物进行化学成分研究,从中华蟾酥中分离得到19个单体化合物,黑眶蟾酥中分离得到5个单体化合物,花背蟾酥中分离得到5个单体化合物,通过理化方法及波谱解析等确定了它们的结构,并将它们进一步精制为纯度98%以上,作为指纹图谱研究和含量测定用标准对照品。其中N'-oxide bufotemne和N'-methyl serotonin为首次从蟾酥中分离得到。 4.从全国14省21市(县)抓捕了29个蟾蜍动物样品,包括6个品种:中华大蟾蜍、华西大蟾蜍、岷山大蟾蜍、黑眶蟾蜍、花背蟾蜍和一个未定名蟾蜍。在实验室条件下,用统一的方法加工制作成蟾酥,作为不同基原蟾酥类药物的对照品。收集到商品蟾酥16个,用来调查商品蟾酥的质量。 5.不同基原蟾酥类药物进行HPLC指纹图谱分析,用分离得到的化学对照品对色谱图中各色谱峰进行标定,得到了具有充分化学信息的不同基原蟾酥类药材指纹图谱。通过比较,发现不同品种蟾酥类药材可通过15个化学成分的有无来鉴定的规律。 6.中华蟾酥含有13个共有成分,它们的比例因产地不同,显示出明显差异;其HPLC指纹图谱可按照地域分为三组:中华蟾酥北方品、中华蟾酥中原品和中


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