褪黑激素和FGF5等对辽宁绒山羊皮肤细胞OCIAD2基因表达及细胞周期增殖的影响

【摘要】：辽宁绒山羊是中国特有的品种,具有产绒量高,绒毛品质好等优点。本实验室近年新发现卵巢癌免疫抗原蛋白(OCIAD2)在辽宁绒山羊皮肤中有表达并与毛囊的生长发育和周期变化有一定关联。而褪黑激素(MT)、成纤维细胞因子5(FGF5)和类胰岛素生长因子1(IGF-1)都与毛囊的周期变化和生长调控有着密切的关系。本研究的目的就是用不同浓度的MT、FGF5和IGF-1作用在羊皮肤细胞后,检测它们对OCIAD2基因表达及细胞周期的影响。并用MT与FGF5或IGF-1的最佳浓度协同作用羊皮肤细胞后,检测它们对OCIAD2的基因表达及细胞周期增殖的影响。通过培养羊皮肤细胞、MT/FGF5/IGF-1作用细胞、提取RNA、反转录c DNA、PCR扩增、实时荧光定量、流式细胞仪测细胞周期增殖等实验方法,得出以下实验结果:(1)不同浓度MT对OCIAD2基因均为抑制作用;不同浓度FGF5对OCIAD2基因均为促进作用;不同浓度IGF-1对OCIAD2基因均为抑制作用;MT与FGF5最佳浓度协同组对OCIAD2有明显抑制作用;MT与IGF-1最佳浓度协同组对OCIAD2有明显促进作用。(2)MT抑制羊皮肤细胞的增殖;FGF5和IGF-1对羊皮肤细胞的增殖无明显影响;MT与FGF5协同抑制皮肤细胞的增殖;MT与IGF-1协同抑制皮肤细胞的增殖。结论:(1)MT和IGF-1能通过TGF-β信号通路下调OCIAD2的表达,而FGF5能上调OCIAD2的表达。MT与FGF5的协同处理能下调OCIAD2的表达,说明MT的抑制作用大于FGF5的促进作用,但MT与IGF-1的协同处理却能上调OCIAD2,说明MT、IGF-1与OCIAD2之间应存在某种信号转导关系,OCIAD2有可能参与了MT、IGF-1对毛囊的调控过程。(2)MT抑制羊皮肤细胞的增殖,FGF5和IGF-1对羊皮肤细胞的增殖无明显影响。而MT与FGF5和MT与IGF-1的两组协同作用中,仍抑制皮肤细胞的增殖,并且抑制程度大于单独作用,说明MT占主导作用。OCIAD2基因的表达量可能与细胞增殖有正相关的关系。