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海带生长素分离纯化及对微藻生长影响的研究

张冬玲  
【摘要】:生长素是一种重要的植物激素,参与并调节植物生长发育的诸多过程。国际上对海藻植物生长素的提取、纯化分离和测定方法的报道很少。定性和定量研究海带生长素还在起始阶段。本论文在陆生生物活性物质提取分离方法的基础上,对于海带生长素的分离提取具体的步骤进行研究,进行单一因素实验和多因素正交实验,优化了海带生长素的分离提取纯化工艺:4℃组织匀浆,95%乙醇浸提,乙醚萃取,硅胶脱色,Sephadex LH_(20)柱层析。并用烟草愈伤组织生根实验和反相高效液相色谱方法对海带生长素进行定性和定量检测。该流程操作方便,准确,重现性好,分离纯化的生长素纯度较高,毒性较低,损失率低,为进一步的生物活性研究和海带生长素及其它植物生长促进剂的开发和利用提供了理论依据。 本论文选取了有代表性的两种微藻:小球藻和盐藻来研究海带植物生长素在微藻生长过程的作用。小球藻生态分布广,易于培养,生长速度快,是进行生物技术研究的很好材料,是单细胞蛋白(SCP)的来源。盐藻内含有大量胡萝卜素、蛋白质、多糖类化合物和微量元素等很多可利用的物质。以IAA标准品为对照,来检测海带生长素对微藻生长过程的影响。大量实验数据表明,海带生长素对于微藻的生长起着重要的作用,0.1~1mg/L的量就能提高多种生理指标的水平。经1mg/L海带生长素样品处理的小球藻多糖含量净增长率为417.54%,蛋白为49.37%;1mg/L样品处理的盐藻蛋白净增长率为38.02%;多糖为16.90%;此研究为微藻的大规模培养奠定了良好的基础。


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