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转基因玉米中植酸酶活性检测方法研究

柳鸿敏  
【摘要】:植酸酶(Phytase)是催化植酸及植酸盐水解成肌醇与磷酸(或磷酸盐)一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶。植酸酶可以分解植酸,释放大量的无机磷,如果在饲料中添加植酸酶,就可以使单胃动物体内的植酸分解出大量的磷,提高有机磷的吸收率,减少磷的排出,减轻磷引起的环境污染。利用植物作为植酸酶的反应器已成为研究的热点。关于饲料中添加的植酸酶的活性检测方法我国已有相应的国家标准,但是植物中植酸酶的活性的检测方法的报道较少,因此研究出科学实用的测定植物中植酸酶的提取和测定的方法具有实际应用意义。 目的: 本文通过对转基因玉米中植酸酶的提取条件和检测条件进行优化,确定适用于玉米中植酸酶提取及活性测定的最佳方法,并且对大田中和盆栽中的转植酸酶基因玉米中的植酸酶活性进行动态监测,为评价转基因玉米中植酸酶活性提供依据。 方法: 采用超声和震荡的提取方法对影响植酸酶提取的条件,如料液比、提取时间、提取液pH值进行单因素分析,在单因素分析中选出植酸酶活性相对较高的实验因素水平,采用L9(33)正交表优化植酸酶的提取条件。 采用分光光度法对影响植酸酶测定的条件,如反应时间、底物浓度、缓冲液pH值进行单因素分析,在单因素分析中选出植酸酶活性相对较高的试验因素水平,采用L9(33)正交表优化植酸酶的测定条件。 应用本文确定的提取和测定方法,对不同生长时期的大田中和盆栽的转植酸酶基因玉米中的植酸酶活性进行检测,并进行比较。 结果: 提取转基因玉米中植酸酶试验结果表明,当料液比为1:4,提取时间为15min,提取液的pH为5.50时,植酸酶的活性最高,提取率最高。 对转基因玉米中植酸酶活性的测定条件研究结果显示,在反应时间是30min,缓冲液pH值为5.50,底物浓度为O.10mmol/L时植酸酶检测活性最高。 不同生长时期大田和盆栽的转植酸酶基因玉米中植酸酶活性与对照组比较,只有部分叶子、茎、根中的植酸酶活性较高,但无显著性差异,转基因玉米籽粒中的植酸酶活性高于对照组。 结论: 根据本文研究结果得出如下结论: 1.采用超声波方法提取转植酸酶基因玉米中植酸酶的最佳条件是料液比为1:4,提取时间为15min,提取液的pH为5.50。 2.采用分光光度法方法检测转植酸酶基因玉米中植酸酶的最佳条件是反应时间是30min,缓冲液pH值为5.50,底物浓度为0.10mmol/L。 3.大田中和盆栽的转植酸酶基因玉米只有部分叶子、茎、根中的植酸酶活性相对于对照组玉米较高,籽粒中的植酸酶活性远远高于对照组玉米。


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2 李学梅;法国将继续暂停种植转基因玉米的禁令[N];中国畜牧兽医报;2008年
3 胡军华;孟山都:转基因玉米影响生育缺乏依据[N];第一财经日报;2008年
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