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PTX3对慢性心房颤动患者心房肌细胞IL-6、TNF-α及NF-κB P65的影响

倪梓元  
【摘要】:AF是临床上最常见的心律失常之一,在我国30岁以上人群患病率为0.77%,并随年龄的增加而增加。另外,由于AF严重危害人们身心健康,并发症多,致残、致死率高,且疗效欠佳,故对其研究越来越受到学者们重视。近年来发现,炎症反应在AF的发生、发展中扮演非常重要的角色。IL-6、TNF-α以及NF-κB是炎症反应的重要组成部分,然而,迄今为止,它们与AF的相关报道结论并不一致。另外,作为一种新的炎症因子,PTX3与AF的关系,以及PTX3与IL-6、TNF-α、NF-κB的相关报道极少。为此,本文通过对AF患者心房肌细胞上清液中IL-6、TNF-α水平和NF-κB P65 mRNA与蛋白表达进行观察,并用PTX3干预,旨在进一步研究它们在AF中的作用,为AF的炎症理论奠定实验基础。 目的:探讨PTX3在慢性AF心房肌细胞中的作用,为AF的炎症理论奠定实验基础。 方法:1、对象选择:选择行心脏外科手术患者22例, AF组11例,男6例,女5例,年龄41.5±4.3岁(36-45岁),心功能Ⅱ级9例,Ⅲ级2例,AF持续时间大于1年。SR组11例,男5例,女6例,年龄40.7±5.3岁(35-46岁),心功能Ⅱ级8例,Ⅲ级3例,无心律失常及AF病史。两组均记录年龄、性别、心功能NYHA分级、心电图、超声心动图及有关实验室检查。排除甲状腺机能亢进,扩张性心肌病、慢性肺源性心脏病、感染的急性期、肥胖、风湿性疾病、血液和造血系统疾病、内分泌和代谢性疾病、严重肝肾功能不全、近期应用抗生素、阿斯匹林(术前7天停用除外),ACEI和ARB、他汀类调脂药物等患者。根据《赫尔辛基宣言》精神,所有患者术前均经伦理委员会讨论,并已征得患者及其家属知情同意。2、标本采集:心脏手术中建立体外循环,于心脏停跳前获取右心耳组织100mg,在除去用血液和脂肪组织后,用10 ml氧饱和的无钙液在37℃保温下,于5-10 min内送到实验室。将AF组分成两份,其中1份加入1ml浓度为12μg/mL的PTX3,与余下1份和SR组一起放入恒温箱中,作用1h,收集上清液。3、实验方法:采用逆转录PCR法、Western Blot法测定心房细胞NF-κB P65 mRNA和蛋白的表达水平,应用ELISA法测定心房肌细胞上清液中IL-6和TNF-a的水平。4、统计学方法:计量资料用均数±标准差(X±S)表示,计数资料用χ2检验,组间比较用t检验,直线相关分析,p0.05为统计学差异。应用SPSS 13.0软件来完成统计分析。 结果:(1)AF组NF-κB P65 mRNA和蛋白表达明显高于SR组,PTX3组NF-κB P65 mRNA和蛋白表达高于AF组,统计学均有显著差异。 (2)AF组心房肌细胞上清液IL-6和TNF-α水平明显高于SR组,PTX3组心房肌细胞上清液IL-6和TNF-α水平高于AF组,统计学均有显著差异。 结论:(1)IL-6、TNF-α以及NF-κB参与了慢性AF的病理过程。(2)PTX3通过对IL-6、TNF-α、NF-κB的影响,促进慢性AF的炎症反应,加重慢性AF的病情。


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