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口腔鳞状细胞癌中CADM1基因表达及启动子区甲基化研究

李男男  
【摘要】:口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma, OSCC)是口腔颌面部中最常见的恶性肿瘤之一,它的发生发展是一个多阶段的过程,在这个过程中多种基因水平发生变化,包括癌基因的激活和抑癌基因的失活。细胞粘附分子1 (cell adhesion molecule 1,CADM1),以前称为肺癌肿瘤阻抑基因1 (tumor suppressor in lung cancer-1, TSLC1)是2001年Kuramochi等在研究肺癌时,通过功能性互补的方法鉴别出的新的肿瘤抑制因子,属于细胞黏附分子中免疫球蛋白超家族,通过趋同性反式相互作用调节细胞与细胞间的黏附。在85%的原发性肿瘤中,CADM1的表达减弱,在多种肿瘤中检测到CADM1的表达缺失。 本研究应用免疫组织化学方法和实时荧光定量PCR的方法检测CADM1蛋白及mRNA表达,结果显示正常口腔黏膜组织CADM1蛋白及mRNA表达无减少或缺失。而口腔鳞状细胞癌组织中CADM1蛋白表达及mRNA表达均显著低于正常口腔黏膜组织。应用甲基化特异性PCR检测基因启动子区甲基化情况,结果显示正常口腔黏膜组织中CADM1基因启动子区无甲基化。口腔鳞状细胞癌组织中CADM1基因启动子区甲基化率均显著高于正常口腔黏膜,基因启动子区甲基化与其在肿瘤组织中CADM1的蛋白表达及mRNA表达下调呈正相关。CADM1基因的蛋白表达、mRNA表达及基因启动子区甲基化均与肿瘤组织的病理分级、临床分期相关,而与病人的年龄、性别、肿瘤部位、直径无明显相关性。应用去甲基化药物5-Aza-CdR处理舌鳞癌Tca8113、SCC-9细胞,结果显示经5-Aza-CdR处理,舌鳞癌Tca8113、SCC-9细胞的存活率明显降低,舌鳞癌Tca8113细胞系中CADM1基因发生去甲基化及mRNA表达上调,且呈药物剂量依赖性,而舌鳞癌SCC-9细胞系CADM1基因未发生去甲基化,且mRNA表达无明显变化。 通过本研究,得出以下结论: 1.在口腔鳞状细胞癌组织中,CADM1蛋白及mRNA表达明显降低,与口腔鳞状细胞癌的发生发展密切相关。 2.口腔鳞状细胞癌组织中,CADM1基因启动子区发生甲基化,是导致CADM1蛋白表达、mRNA表达下调的重要原因之一 3.舌鳞癌Tca8113细胞系CADM1基因去甲基化后,CADM1基因表达上调,而舌鳞癌SCC-9细胞系CADM1基因未发生去甲基化,CADM1基因表达无变化,进一步说明CADM1基因甲基化与其蛋白表达、mRNA表达下调密切相关。 4. CADM1基因的表达及甲基化均与口腔鳞状细胞癌的病理分级、临床分期相关,可能是影响口腔鳞癌预后的重要因素。


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