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NDGA与去细胞肌肉支架及AECs联合治疗大鼠脊髓损伤的研究

张秀英  
【摘要】:本研究拟观察去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid,NDGA)在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)中是否具有抗炎作用,并利用NDGA的抗炎特性促进移植入损伤脊髓的羊膜上皮细胞(amniotic epithelial cells,AECs)的存活,并联合化学去细胞肌肉支架共同治疗大鼠脊髓半横断损伤,为脊髓损伤的治疗研究提供理论和实验依据。 1.观察NDGA对脊髓损伤的影响 炎症反应在脊髓损伤后继发性病理反应的发生发展过程中起重要作用。我们在脊髓损伤后早期应用NDGA,发现NDGA对脊髓损伤后的中性粒细胞和巨噬细胞/小胶质细胞具有抑制作用,并可以减轻星形胶质细胞的反应,对脊髓神经元的存活具有促进作用,提示NDGA可以在脊髓损伤后发挥抗炎作用,减轻脊髓损伤的继发性损伤。 2.确定NDGA应用的治疗剂量 细胞移植是治疗脊髓损伤的一个重要手段,但其面临的一个重要问题是炎症反应的攻击使移植细胞存活的数量急剧减少。我们在脊髓损伤后早期应用不同剂量NDGA,观察NDGA的抗炎作用是否可以促进移植羊膜上皮细胞的存活。结果显示,30mg/kg和40mg/kg的NDGA对羊膜上皮细胞的存活有促进作用,为降低NDGA对新生血管的抑制作用,所以确定下一步研究中采用的NDGA的剂量为30mg/kg。 3.NDGA联合羊膜上皮细胞和去细胞肌肉支架治疗大鼠脊髓损伤的效果 如何有效的促进轴突有向再生以重建中断的脊髓神经传导通路是脊髓损伤治疗的重要目标。本课题组前期工作已经证实化学去细胞肌肉组织工程支架平行交通的内部结构能够引导轴突有向再生,而羊膜上皮细胞则由于具有多种生物学特点逐渐受到再生医学领域的关注。本研究采用NDGA结合羊膜上皮细胞,并与去细胞肌肉支架联合移植治疗脊髓损伤。结果显示,细胞支架联合移植比单独支架移植更好的促进了5-HT阳性神经纤维和有髓神经纤维的再生以及大鼠的功能恢复,但NDGA的应用对神经纤维的再生和大鼠功能恢复没有明显的促进作用,提示单纯改善外源性因素对促进轴突再生的效果有限。 综上所述,本研究结果表明NDGA对炎症细胞的浸润有明显的抑制作用,并能够抑制反应性星形胶质细胞的增生;NDGA能够明显增加移植大鼠体内羊膜上皮细胞的存活数量;NDGA对神经纤维再生和脊髓损伤大鼠的运动功能恢复未见明显的促进作用。


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