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儿童感染性肝损伤的血清代谢组学初步研究

李常晓  
【摘要】:肝脏是人体新陈代谢的中枢器官,承担了大部分的合成、分解、转化等代谢过程,因此,系统研究肝脏损伤后的代谢组变化意义重大。代谢组学研究生物体系的代谢产物及代谢中间产物,从整体上发现代谢物谱的改变或不同,充分反映生物体系对基因、外界环境改变等刺激因素的应答状况,进一步阐明机体代谢途径。目前,已在成人肝损伤的代谢组学研究方面取得初步进展,而在儿科领域尚未有相关研究报道。基于儿童机体的特殊性,本文通过建立代谢组学平台寻找儿童感染性肝损伤的生物标志物。 本研究采用高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)技术,建立了以此为基础的代谢组学研究平台,应用不同的统计分析方法,比较感染性肝损伤患儿与正常对照儿童之间血清代谢组的差别,并进一步从中寻找可能的生物标志物。 实验纳入的研究对象有30名感染性肝损伤患儿及30名正常对照儿童。采集研究对象的清晨空腹血样,测定其肝功能,留取血清样本。将样本经去蛋白等前期处理后进行HPLC-MS/MS分析,获得原始质谱分析数据,在Markerview软件中对其进行峰检测、滤噪、峰对齐等处理,并将结果导入到二维表中,进行“80%规则”处理、峰面积归一化完成数据标准化前处理。对处理后的数据分别采用PCA联合t检验、聚类分析及SAM方法进行分析,并利用数据分析的结果进一步筛选生物标志物。 研究发现感染性肝损伤组和正常对照组之间的代谢物谱存在明显差异,利用PCA联合t检验方法可获得23种儿童感染性肝损伤的潜在生物标志物,利用聚类分析方法所得热图可直观显示两组间45种差异代谢物,利用SAM方法获得9种儿童感染性肝损伤的潜在生物标志物。


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