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阳离子明胶纳米微球的制备及其性能研究

刘朕哲  
【摘要】:明胶是一种从胶原中提取的水溶性大分子链,无毒性,无免疫原性,具有良好的生物相容性和生物降解性。以明胶大分子为原料,表面修饰乙二胺制备出的阳离子明胶纳米微球可作为一种基因纳米载体,结合、浓缩目的基因,保护其免受血浆和组织中各种酶、补体的破坏,应用于基因治疗中具有良好的前景。 目的:制备生物功能性的明胶纳米微球并对其进行表征,同时研究其生物学性能。 方法:本实验通过乙二胺对明胶进行羧基封闭,采用去溶剂法制备阳离子明胶纳米微球,利用激光粒度测定仪、透射电镜、扫描电镜对其粒径分布、Zeta电势分布及形貌特征进行研究。通过MTT测试、细胞摄取实验和DNA包封率来评价阳离子明胶纳米微球的生物学性能。 结果:本实验通过乙二胺对明胶进行羧基封闭,采用去溶剂法制备的阳离子明胶纳米微球形态规则,大小均一,分散性良好,粒径分布为150-300nm,Zeta电势平均为30mV。将阳离子明胶纳米微球通过与pEGFP混合、搅拌,制备出质粒DNA与明胶微球质量比分别为5%和10%的pEGFP/明胶纳米微球,包封率分别为72%和68%,载药量分别为3.6%和6.8%。MTT测试结果说明阳离子明胶纳米微球在一定范围内对MC3T3细胞的增殖没有明显影响;共聚焦激光扫描显微镜观察发现FITC标记的明胶纳米微球可以被MC3T3细胞摄取。 结论:乙二胺对明胶进行羧基封闭,采用去溶剂法制备的阳离子明胶纳米微球无细胞毒性,生物相容性好,可以被MC3T3细胞摄取,具有运载基因的功能,是一个具有良好应用前景的生物纳米基因载体。


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