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辐射抑制TURP术后再狭窄的作用及机制研究

谷欣权  
【摘要】:前列腺增生症(BPH)是老年男性最常见的疾病之一,经尿道前列腺切除术(TURP)是近年发展起来的治疗BPH的新方法,其有创伤小、恢复快,适应症广等优点.但TURP术后15-20%的患者在1-10年内出现再狭窄,致使远期治疗效果不理想。预防TURP术后再狭窄的研究在国内外迄今尚属空白,寻求一种快速安全、经济无创、有效的预防方法是目前亟待解决的新课题。放射性核素内照射治疗作为一种新兴治疗措施日益受到人们的普遍关注,利用其电离辐射作用于细胞分裂增殖的各个环节和时期,从而诱导细胞发生凋亡。TURP术后增生的前列腺组织是由平滑肌、纤维组织、血管和腺上皮等成分构成,利用放射性核素诱导前列腺细胞发生凋亡以抑制细胞过度增殖,有望成为预防TURP术后再狭窄的新途径。 本课题通过临床观察评价β射线辐射抑制TURP术后再狭窄的有效性和安全性;利用辐射后的前列腺组织和体外培养的前列腺细胞观察β射线辐射促进细胞凋亡的作用;通过检测前列腺组织的凋亡调控基因表达水平的改变,阐明辐射抑制TURP术后再狭窄的细胞分子机制,为临床广泛应用放射性核素预防TURP术后再狭窄提供重要的理论依据。 1.辐射抑制TURP术后再狭窄的作用和安全性研究 将BPH患者分成辐射治疗组(A组,应用~(90)Sr/~(90)Y尿道型前列腺增生治疗器治疗BPH),辐射预防再狭窄组(B组,于和TURP术前行β射线内照 招月叶抑创TURP木浦纷子不狡今的作用之瓦帆创月开究 中文摘要 射)和对照组(C组,单纯行羚即治疗)。应用体模检测辐射剂量发现, 在O一l:llnm范围内,各组间的吸收剂量变化显著,在l:1一5()川.。范围内,测 量组间的吸收剂量无显著变化:应用剂量率仪测量人体表而不同部位的辐 射剂量可见,人体各部位吸收剂量当量均在安全范围:观察各组临床症状 改善情况可见,八组患者尿频与排尿困难的临床症状明显减轻,川刃议明显 升高,l)vR、卜四S明显下降,与治疗前比较差异显著,竹组与C组在’比川’ 术后临床症状均明显好转,两组的川;l之、}’v尺、卜!’洲和前列腺体积在‘1[!1{1’ 术后与术前比较差异显著,!弓组在T眼!,术后l年内各项指标稳定,而C 组‘lU川,术后l年,姗议降低,同时I)vl之、卜尸邓升高,与l弓组比较差异显 著,说明C组前列腺组织在’f以!,术后又出现不同程度的增生;通过对未 经日射线辐射和受日射线辐射不同时间的增生前列腺组织进行病理组织 学观察可见,日射线电离辐射后,前列腺腺泡逐渐萎缩,腺细胞高度、数 量和腺体大小均减小,腺管横断面积减少;超微结构显示辐射后细胞核变 圆,染色质边集,线粒体均质化,核浓缩或碎裂形成凋亡小体,证实辐射 后可导致细胞凋亡或坏死,从而抑制再狭窄的发生。 2.辐射抑制‘rU即术后再狭窄的机制研究 将临床确诊的前列腺增生患者分别于’I’L:即术前!、」、7、l别进行 9()sr/’)0Y内照射,与未经辐射的前列腺增生组(对照组)和正常前列腺组 (正常组)进行对比分析,探索辐射抑制『f以尸术后再狭窄的细胞分子机 制:采用免疫组织化学定性和Western blot半定量检测前列腺组织中bC!一2、 bax、丁GF一日l、bFGF蛋白表达,原位杂交检测各组__L述基因,11RNA表达 水平的变化,结果可见对照组bCI一2蛋白表达高于正常组,应用日射线内 照射后前列腺组织中bC!一2蛋白表达明显低于对照组,卜CI一2!11RN八与bcl一2 蛋白表达水平的变化规律一致;正常组上皮细胞bax蛋自表达高于对照 组,间质细胞bax表达与对照组无显著差异,并月_对照fII上皮和间质细胞 bC卜2蛋白表达高于bax蛋白.经日射线辐射后上皮细胞中比x蛋白表达 明显高于对照组,bax .oRNA的表达水平变化可见,正常组卜皮细胞中bax 枯月叶抑侧TURP术后再狡今的作用及机侧研文 中文摘委 nl RNA表达高于对照组,与对照组比较日射线辐射后_L皮和间质中bax nl RNA表达明显升高:对照组上皮和间质’rGF一日!蛋白表达与正常组比较 无显著性差异,p射线辐射后前列腺_L皮和间质中‘rGIi’一卜:蛋白表达增 高,由TGF一日!mRNA表达水平改变发现,TGF一日.:11RN八表达在正常组 和对照组间无显著性差异,应用卜射线内照射后前列腺卜皮和间质中 TGF一p.阳性细胞率明显升一高,与对照组比较差异有显著性;对照组bFGF 蛋白表达高于正常组,p射线内照射后上皮和间质中bl了(il了蛋自表达减少, 对照组bFGF mRNA表达高于正常组,日射线内照射后bI了GI了,11RNA表达 阳性细胞率明显下降;采用TUNEL染色、流式细胞术、DNA琼脂糖凝 胶电泳检测”0s产,Yp射线照射后前列腺细胞凋亡情况,综合分析发现, 在正常组有少量细胞凋亡发生,对照组偶见细胞凋亡,日射线辐射后细胞 凋亡增多,在二倍体峰前出现亚二倍体峰即“凋亡峰”,井随时间而逐渐 增加,至辐射后7d达到高峰,辐射7d的基因组呈现典型的凋一亡改变即 DNA Ladder。 3.p射线对原代培养前列腺细胞的内辐射研究 将原代培养大鼠前列腺细胞,分为正常组、高剂量辐射组和低剂量辐 射组进行对比研究,正常组前列腺细胞形态正常,贴壁生长,呈典型的上 皮型细胞形态,高剂量辐射组可见散在的细胞核嗜碱性增强,核固缩、碎 裂


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