收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

rhBMP-2促进兔胫骨延长区骨愈合及骨髓基质干细胞增殖和转化的实验研究

徐鹏  
【摘要】:牵拉骨再生(distraction osteogenisis,DO)是骨干或干骺端截骨后,通过外固定器对截骨两端进行持续、缓慢,高频牵拉,刺激骨形成的一种独特方法,在临床上广泛用于治疗骨缺损,肢体不等长,先天性胫骨假关节,身材矮小等疾病。尽管临床上以合适的速率延长,但是新生骨的形成不总是令人满意。长时间的外固定治疗除了对病人心理和行为造成不良影响外,并发症的发生可能导致治疗的失败。因此,如何促进延长区骨愈合、减少并发症的发生是骨科医师亟待解决的问题。为促进延长区骨愈合,人们做了大量实验研究,包括对延长区进行机械刺激,电刺激,延长区移植自体骨髓细胞及成骨样细胞,局部或全身应用rhbFGF(重组人碱性成纤维细胞因子)、rhGH(重组人生长因子),维生素D3等,虽有一定的作用,均未取得理想的效果。牵拉骨再生的骨愈合与正常骨折愈合,胚胎时期骨发育有许多相似之处,在骨生成和骨修复的过程中,有许多细胞因子,激素,细胞外基质等在调节骨再生及骨塑型的某些方面发挥重要作用,骨形态发生蛋白(BMPs)是这些因子中骨诱导性最强的因子。自1965年Urist将去矿化骨基质植入动物肌肉内,诱导异位成骨的产生,从此BMPs被描述为去矿化骨基质中引起异位成骨的物质,随后BMPs被提纯,开始应用于动物实验和临床研究,开创了骨组织工程学的新局面。BMPs已有十余种成分,其中BMP-2由于其强大的成骨能力,具有促进成骨前体细胞增殖和向成骨细胞分化的作用,在治疗临界性骨缺损,软骨缺损,脊柱融合的动物实验方面进行了大量研究,而BMP-2与牵拉骨再生的关 系方面报道很少。 够向成纤维细胞、 骨髓基质干细胞(BMSc)是多种细胞的前体细胞,能 网状细胞、脂肪细胞和成骨细胞方向转化。 时,牵拉两骨端产生的张力是产生新的骨组织的重要刺激物, 牵拉骨再生 在牵拉期间 两骨端间的日MSc对新骨形成起着重要作用,应努力促进BMSc向骨的 前体细胞分化,以有利于延长区骨形成。我们研究了rhBM尸一2(重组人 骨形态生成蛋白2),b「G「对体外培养的BMSc增殖及转化的作用,建 立兔胫骨延长区骨再生不良动物实验模型,研究了rhBM尸一2经皮注射到 兔胫骨,延长区对于00延长骨愈合的作用,探索促进00延长区骨愈合的 方法。 1 BMSc培养及成骨分化的研究 目的:研究兔骨髓基质细胞的生长情况,观察细胞在培养状态下成骨 分化及分化后成骨细胞的鉴定,研究BMSc短期冻存后复苏,其增殖和成 骨分化的情况。方法:兔骼峭部抽取!ml骨髓进行体外培养,显微镜下观察 BMSc的生长情况,用MTI.法检测细胞增长和存活情况,采用改良Gomori 钙钻法计数细胞碱性磷酸酶(ALp)阳性率。冻存细胞解冻后,接种培 养,观察其增长和分化情况。结果:兔骨髓基质细胞在培养条件下形成集 落并持续扩增,其中部分集落碱性磷酸酶(ALP)表达阳性,细胞接近 汇合时有近70%的细胞有AL尸活性表达,汇合后能够形成钙化小结。 BMSc冻存复苏后成骨能力及分化能力无明显降低。结论:BMSc采集容 易,增殖能力强,在体外具有明确的成骨分化能力,大量扩增及冻存复苏 后成骨能力及分化能力无明显降低。深低温冰箱短期保存细胞简单、经济, 有利于BMSc短期内多次培养和使用。 Zrh日Mp一2,bFGF对骨髓基质干细胞增殖及转化的影响 目的:探讨rhBM尸一2,b「G「单因子及联合应用对BMSc增殖及转化 的影响,为将骨髓基质干细胞大量扩增为高效成骨细胞,为进一步研究 rhBM尸一2,b「G「单独或联合应用治疗肢体延长区骨愈合提供实验依据。方 法:分别以不同浓度的rhBMp一2、b「GF作用于骨髓基质细胞,检测细胞 增殖情况及细胞的AL尸活性,比较rhBMp一2、bFG「的效应、同因子不 同浓度的效应以及rhBM尸一2、bFG「联合应用的效应。结果:当rhBMP一2 浓度在800ng/m!以下时,BMSc AL尸活性呈剂量依赖性。当rhBM尸一2 浓度在800一1 20Ong/m!时,各组BMSc ALp活性无明显差别。当 rhBMp一2浓度大于1200ng/ml时,BMSe ALP开始活性下降。当 rh BMP一2浓度在800ng/ml以下时,各组BMSe OD值(MTT法测定, 反映细胞增殖情况)无显著差异,当rhBM尸一2浓度大于800ng/m!时, BMSe OD值逐渐减小。在培养10天时,随着bFGF剂量增如,BMSe ALP 值逐渐下降;当b「GF浓度在1000ng/ml以下时,随b厂G「剂量增加, 各组骨髓基质细胞的00值逐渐增高,当浓度在800一1 6O0ng/ml时,各 剂量00值无明显差别。rhBMp一2、b「G「联合应用能同时促进BMScALP 活性和00值。结论:rhBMP一2对BMSc具有强诱导分化作用,bFGF对 BMSc具有促增殖作用,二者联合应用能同时促进细胞增殖及分化。 3 rhBMp一2局部注射促进兔胫骨延长区骨愈合 目的:研究rhBMP一2经皮注射到兔胫骨延长区,对于延长区骨愈合 的作用。方法:日本大耳白兔42只按llizarov方法制成右侧胫骨延长模 型,胫胖联合下方二次截骨,使胫骨缩短1厘米,安装自行设计的微型双 臂外固定器,术后第7天开始延长,行快速延长(2次/天,lmm/次,Zmm/ 天),共延长,0天,Zcm。42只兔子中,因各种原因有6只兔子被淘汰, 其余 36只兔子被随机分为三组,对照组:延长区注射0.,m!醋酸盐缓冲 液;H组:延长结束后


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 王华东;侯树勋;李文峰;张伟佳;吴克俭;;单侧外固定器结合植骨治疗肱骨干骨折内固定术后不愈合[J];中国骨与关节损伤杂志;2005年11期
2 贾湘谦,陈艺新,彭少英,陈克洲,张汇林,肖杰,宋开方,何辉;外固定器治疗四肢骨折198例分析[J];贵州医药;1999年06期
3 黄俊晓,李毅中,傅小杯,吴佩琴;Ilizarov外固定器治疗胫骨骨不连[J];福建医科大学学报;1997年02期
4 于洪祥,阮洪涛,杨少芹;单侧轴向外固定器结合有限内固定治疗胫腓骨骨折[J];中国矫形外科杂志;2003年21期
5 王洪亮,冯承泉,毕复海;外固定器加植骨治疗胫骨骨不连接40例[J];山东医药;1997年07期
6 O'Sullivan ME;刘世杰;;固定物对骨折愈合影响的新概念[J];国际骨科学杂志;1990年01期
7 张伟,张新,徐莘香,刘建国;应力遮挡对延长骨力学性能的影响[J];白求恩医科大学学报;1994年04期
8 祝乾清;兰泽军;陈久毅;周建鸿;宁增恩;;外固定器在四肢长骨骨不连手术治疗中的应用[J];山东医药;2010年43期
9 邓京城,潘少川,于风章,祁新禹,孙保胜;Ilizarov外固定器治疗小儿下肢骨不连接的临床研究[J];北京医学;2001年03期
10 李文锋;侯树勋;王庆雷;;微创截骨外固定器固定治疗膝内翻畸形[J];中国矫形外科杂志;2006年07期
11 张哉炯,施国强,温荣彬,王光华;半环槽式外固定器治疗严重开放粉碎性胫腓骨骨折(附23例报告)[J];中国矫形外科杂志;2000年03期
12 乔林;侯树勋;张树明;李文峰;陈福文;徐建强;;微动对骨折端骨密度的影响[J];中国骨伤;2007年09期
13 邵林;赵震宇;刘建宇;郝晨光;;可调式单边外固定器下骨内移位技术治疗胫骨创伤后节段性骨缺损[J];中国康复理论与实践;2010年06期
14 王宇飞;王钢;王勇;贾健;陈东栋;刘建;;夏和桃组合外固定器治疗胫骨开放骨折[J];骨科;2010年03期
15 彭智;简月奎;张美心;赵伟峰;丁一;王远政;杨震;;半环槽外固定器治疗先天性胫骨假关节[J];贵州医药;2009年10期
16 彭喆;唐世斌;马彪;张湘生;;同期加压延长治疗伴有骨缺损、肢体短缩的长骨不连[J];中国现代手术学杂志;2007年01期
17 张远金,陈又年,卢杰,李松柏;单侧多功能外固定器对肢体骨折不愈合的康复作用[J];中国临床康复;2002年22期
18 秦泗河;;Ilizarov技术概述[J];中华骨科杂志;2006年09期
19 宋?,施志琴;单侧多功能外固定器治疗胫腓骨骨折181例[J];天津医药;2000年01期
20 姜佩珠;赵金忠;安智全;蔡培华;孙鲁源;曾炳芳;;应用加压延长骨迁移技术治疗长骨缺损或短缩畸形[J];中国骨与关节损伤杂志;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张兴平;;中西医结合骨穿针外固定器疗法治疗现状及展望[A];首届全国中西医结合骨科微创学术交流会暨专业委员会成立大会论文汇编[C];2011年
2 吴国正;姜岳武;刘玉武;;外固定器在重度骨盆骨折急诊救治中的应用[A];浙江省医学会骨科学分会30年庆典暨2011年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2011年
3 贺西京;陈君长;李辉;;外固定器牵拉腰椎对马尾诱发电位及功能的影响[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
4 彭智;简月奎;张美心;赵伟峰;丁一;王远政;杨震;;半环槽外固定器治疗先天性胫骨假关节[A];2009第一届贵州骨科论坛论文汇编[C];2009年
5 张伟佳;孙大铭;吴克俭;王富;侯树勋;;外固定器和股骨近端髓内钉治疗老年股骨粗隆间骨折的疗效比较[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
6 宋西正;王文军;王麓山;刘洪;刘利乐;姚女兆;胡文凯;晏怡果;;脊柱外固定器联合椎间盘镜技术治疗胸腰椎爆裂性骨折[A];第一届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会暨中国康复医学会脊柱脊髓损伤专业委员会脊髓损伤与康复学组成立会论文汇编[C];2009年
7 刘洪鹏;周晓中;宋祥胜;顾军;徐炜;董启榕;;低剂量X线照射促进骨髓基质细胞增殖分化的研究[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
8 胡琼华;王鹏;汪锋;林涛;易阳艳;袁敬东;万磊;;酒窝形成外固定器的设计及自然酒窝的成型[A];江西省第六次中西医结合皮肤性病学术交流会、江西省第一次中西医结合医学美容学术交流会论文集[C];2008年
9 潘少川;;Ilizarov矫正畸形的原理[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
10 洪嵩;;AO外固定器结合一期自体骨移植治疗胫骨感染性骨不连[A];2009第一届贵州骨科论坛论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐鹏;rhBMP-2促进兔胫骨延长区骨愈合及骨髓基质干细胞增殖和转化的实验研究[D];吉林大学;2004年
2 郝敬东;ILizarov技术的实验与临床研究及骨髓基质干细胞增殖及转化的条件[D];苏州大学;2002年
3 胡平安 ;BMP-4与17β-雌二醇诱导小鼠骨髓基质细胞株MBA-1分化的研究[D];中南大学;2003年
4 李军;骨形态发生蛋白-2转染骨髓基质细胞的生物学特性和其骨诱导修复作用[D];第四军医大学;2004年
5 孙兵;表达GDNF的骨髓基质干细胞治疗帕金森病的实验研究[D];苏州大学;2004年
6 龙华;腺病毒介导促软骨生长因子基因转染兔自体骨髓基质干细胞修复关节软骨缺损的实验研究[D];第四军医大学;2004年
7 陈金武;骨髓基质干细胞向软骨细胞分化的实验研究[D];第四军医大学;2004年
8 许卫兵;兔骨髓基质干细胞体外培养复合β-磷酸三钙构建组织工程化骨进行胸椎后路融合的实验研究[D];第二军医大学;2004年
9 金丹;逆转录病毒介导hBMP-7基因转染兔骨髓基质干细胞体内外成骨实验研究[D];第一军医大学;2002年
10 乔林;微动对骨愈合的影响及作用机理[D];中国人民解放军军医进修学院;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗雷茗;改良型单侧外固定器的生物力学实验研究[D];泸州医学院;2010年
2 王志荣;鞍式腰托的研制与分析[D];福建中医学院;2003年
3 王华东;新型骨外固定器的研制与临床应用[D];第四军医大学;2005年
4 王爽;大鼠骨髓基质干细胞的分离培养及分化潜能鉴定的实验研究[D];中国医科大学;2004年
5 邵云峰;镶嵌式外固定器治疗下肢创伤感染性骨不连的临床分析[D];中南大学;2009年
6 曹轶伦;镶嵌式外固定器尺骨延长术治疗尺骨远端遗传性多发性骨软骨瘤致前臂畸形的近期临床分析[D];中南大学;2010年
7 郑志宏;用分子组织工程学方法研究转化生长因子β_1对骨髓基质干细胞生物活性的影响[D];第四军医大学;2002年
8 周和平;真核表达载体pcDNA3.0-Cx43的构建及其在MSC中的表达[D];第四军医大学;2004年
9 李爱国;兔骨髓基质干细胞诱导分化修复膝关节软骨缺损[D];暨南大学;2004年
10 李士华;单味中药对兔骨髓基质细胞增殖影响的实验研究[D];山东中医药大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 秦泗河;伊里扎洛夫的发明对医生创新的启示[N];健康报;2006年
2 张元兴吴宏忠;从药效学研究认识阿胶(之三)[N];科技日报;2008年
3 左中男;保住锁骨的臂丛神经探查术[N];健康报;2007年
4 薛灿;竹制产品有讲究 巧妙设计引商机[N];中国信息报;2009年
5 吕斌;老人四肢骨折不能以躺待愈[N];大众卫生报;2005年
6 董丽;骨折复位后何时复查[N];医药养生保健报;2007年
7 冯磊;永不言弃的追求[N];中国中医药报;2008年
8 本版编辑 北京垂杨柳医院矫形外科主任医师 奏泗河 黑龙江省鹤岗市人民医院主任医师 班甡生 江苏省卫生法学会副秘书长 胡晓翔 福州市政协委员 林星 武钢二医院外科主任医师 纪光伟;我为开好学术会支招[N];健康报;2008年
9 本版组稿、策划 沈树理;诚信服务 创建百姓放心医院[N];今日信息报;2006年
10 黎宁;骨折病人能否进行性生活[N];家庭医生报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978