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鸡甲胺磷中毒性神经肌病的神经病理及药物干预治疗

周艳  
【摘要】:有机磷中毒迟发性神经病(Organophosphate induced delayed neuropathy,OPIDN)是农药中毒后的严重并发症。甲胺磷(Methamidophos)被认为是属于迟发性神经毒性高的有机磷杀虫剂,本实验重点研究三磷酸胞苷二钠(CTP)在预防和治疗甲胺磷中毒后引起的迟发性周围神经病临床效果及病理变化,明确CTP、地塞米松对OPIDN是否有保护作用。 Leghorn母鸡105只,体重1.54±0.14kg ,随机分为5组,正常组、盐水对照组、小剂量 CTP 组、大剂量 CTP 组、地塞米松组。方法如下:断食24小时后用植物油溶解的甲胺磷(10mg/kg)按2ml/kg体积通过套管直接灌入鸡素囊中,染毒的鸡用阿托品保持度过急性期,染毒前20分钟8 mg/kg肌注,染毒后3、6、10小时4 mg/kg肌注。从染毒后第2天开始各组均连续给药1周,所有药物均按照1ml/kg肌注。盐水对照组用0.9%生理盐水每日按1ml/kg肌注,CTP剂量以体表面积成人剂量计算,CTP用生理盐水稀释,小剂量CTP组每日1.5 mg/kg,大剂量CTP组每日3.0 mg/kg,地塞米松组每日1 mg/kg。染毒后观察鸡流涎、流泪、呼吸、瞳孔、肌束颤动、步态等症状变化,每周称重,并每日观察迟发神经毒性的临床体征,临床OPIDN的分级标准按照1987年Robertson的分级标准:0级-没有体征;1级-步态异常;2级-动物用后臀休息但还能站立;3级-完全瘫痪。染毒后1、2、3、4、8周末在水合氯醛腹腔深麻醉后,将Leghorn鸡固定于实验台上,进行腓总神经活检,制备光镜、电镜标本,观察神经纤维超微结构变化及形态计量学分析,并应用单纤维剥离技术,观察其病理形态学改变,对照比较不同方法治疗的效果。采用两因素方差分析及Tukey两两比较进行统计学分析。 WP=37 本实验中临床症状3周达高峰,第8周时步态已经基本恢复正常。地塞米松组和大剂量CTP组第1、2周周围神经病临床评分与对照组无明显差异,第3、4周周围神经病临床评分明显低于对照组,症状相对较轻,恢复较快。光镜下甲苯胺兰染色第2周末即出现髓鞘轻微改变,第3周末出现部分神经纤维变性,髓鞘深染形状不规则, 神经轴索肿胀,排列紊乱。这种改变在第4周末最典型, 髓鞘排列松散,有些髓鞘过度内褶,侵入到轴浆内。光镜下第8周末有髓纤维密度明显增加,小径薄髓纤维数目增加尤为明显。电镜下电子双重染色第3周末有髓神经纤维髓鞘增厚、板层分离、松解,轴索肿胀,结构不清。在形态计量学分析时,纤维大小分布差异明显,大径有髓神经纤维百分比减少,至第8周末小径纤维显著增加。大剂量CTP组、地塞米松组与正常组的横断面神经单纤维的面积变化相比具有显著性差异(P0.05)。 采用神经单纤维剥离技术,光镜下见盐水对照组第1周末即有神经纤维不规则,髓鞘起皱折、折叠(B类)等轻微改变,而小剂量CTP组第2周末、大剂量CTP组和地塞米松组在第3周末出现上述改变。小剂量CTP组第2周末神经纤维伴有结旁或结间节段脱髓鞘,结旁轴突肿胀(C、D类)等改变,有些纤维逐渐变性,郎飞结旁限局性肿胀,卵圆体或髓球呈线性排列,结间髓鞘厚度变化明显(E、G类),而大剂量CTP组和地塞米松组在第3周末出现上述改变。盐水对照组、小剂量CTP组第3周末、大剂量CTP组和地塞米松组在第4周末病变程度达到高峰,在同一时间段小剂量CTP组与盐水对照组的轴索及髓鞘的改变又有差异,前者改变相对较轻。盐水对照组第8周末、大剂量CTP组和地塞米松组在第4周末撕单纤维可见神经纤维结间髓鞘变短,可规则或不规则,形成腊肠状(F、G类),结间距离明显缩短,提示有髓神经纤维再生的出现。 WP=38 在显微标尺参照下随机测量同一视野下神经单纤维两个郎飞结间的距离,显示大剂量CTP组与正常组、盐水对照组、小剂量CTP组、地塞米松组的同一视野下神经单纤维郎飞结间的距离组间比较有显著性差异(P0.05);各组内第1、2、3、4周分别与第8周相比均具有显著性差异(P0.05)。其中,盐水组、小剂量CTP组第4周郎飞结间的距离明显增宽。盐水组第8周、大剂量CTP组和地塞米松组在第4周末郎飞结间的距离缩短。提示有髓神经纤维再生的出现。说明有髓神经纤维的损伤开始恢复。 本实验病理改变显示第2周末神经开始变性,第3、4周神经变性达高峰,此后逐渐恢复。远端纤维比近端纤维受累早且严重;粗纤维比细纤维更易感。病损性质为轴索变性,随后伴发髓鞘变性。本实验证实甲胺磷中毒迟发性神经病具有自愈性,鸡需要2个月。大剂量CTP组、地塞米松组与盐水对照组、正常组的光镜、电镜及形态学观察均有明显差异。染毒同时应用CTP、地塞米松,神经也变性,唯变性时间推迟1周,变性程度较轻,持续时间短,修复时间提前,提示CTP、地塞米松有减轻染毒后神经组织病损程度和使病损组织加速自愈作用,但不能免除病损发生。激素起作用的原理可能是通过抑制中毒患者体内毒性物质转化、毒性物质对神经肌肉组织的直接损伤或者通过增强线粒体膜,加速糖原颗粒形成而起到减轻中毒后神经肌肉损害和促进病损组织恢复,使得迟发神经肌病提前治愈。由于激素可并发许多不良反应,又有许多禁忌证,使其应用受到限制。而CTP能提高神经细胞抗损伤能力、促进神经突起的再生长,可以有效地防止神经细胞损伤或缺血后的继发死亡,无明


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