葛根素注射液对大鼠缺血—再灌注心肌细胞凋亡的影响

【摘要】：葛根素注射液(Pueraria Injection)是从豆科植物野葛干燥根中经分离纯化而得到的一种异黄酮。本实验利用大鼠心肌缺血-再灌注模型来模拟人类急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后的溶栓过程,通过检测血清脂质过氧化物(LPO)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、应用末梢标记TUNEC法、免疫组化法光镜下观察心肌细胞凋亡及相关基因Fas和Bcl 2蛋白表达,了解再灌注损伤与细胞凋亡的关系,并用葛根素进行干预,观察其在再灌注损伤中的作用,寻找安全有效的,通过抑制细胞凋亡来挽救心肌的治疗药物。 结果表明:葛根素治疗A组、B组与再灌注组相比,血清LPO含量明显减少,SOD活性明显增高:葛根素治疗A组与B组相比,血清LPO含量和SOD活性无显著性差异,提示葛根素可通过某种机制使脂质过氧化过程受到抑制和提高内源性抗氧化酶活性而减轻氧自由基对心肌的损伤,具有抗氧化作用,而且于心肌缺血前预防性给药和缺血.再灌注前给药均有效,提示葛根素可能在抗氧化作用方面不仅能减轻心肌缺血-再灌注损伤,而且对心肌缺血-再灌注损伤有预防性作用。于大鼠短暂缺血30min后观察,未见凋亡细胞数量增多,再灌注240min于缺血的左室壁发现大量的心肌细胞凋亡出现,证实存在再灌注心肌细胞的损伤,且在短暂缺血后再灌注心肌细胞死亡主要为细胞凋亡;葛根素治疗A组左室壁仍可见到较多凋亡细胞,较再灌注组无差异,但葛根素治疗B组左室壁的凋亡细胞较A组明显减少,表明在心肌缺血-再灌注前给药可明显减少再灌注引起的细胞凋亡,提示对心肌缺血再灌注损伤的保护点可能在再灌注期。葛根素治疗组较缺血-再灌注组Fas蛋白表达明显减少、Bcl-2蛋白的表达明显增高,提示葛根素可通过下调Fas蛋白的表达、上调Bcl-2蛋白的表达发挥其抗凋亡作用。