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人参皂苷单体Rb_1对缺血心肌细胞离子通道作用的研究

李丽  
【摘要】:缺血性心脏病(Ischemic Heart Disease IHD)是由于心脏冠状循环改变,引起冠状血流和心肌需求之间不平衡而导致的心肌损害。其最常见的病因是冠状动脉粥样硬化引起的冠状动脉狭窄和闭塞。无论在发达国家还是在发展中国家,IHD都是重要的致死性疾病,严重地威胁着人类的健康。目前临床所应用的各种药物均有一定的局限性,还不能满足需要,寻找新的、安全有效的药物用于防治IHD 成为医学研究的重要课题之一。 Rbl属于人参二醇组皂苷的一个单体,现代医学研究证明人参皂苷Rb1可以通过改善缺血心肌代谢,减少左室做功, 降低心肌耗氧量, 增加心肌供血,对抗自由基氧化损伤,抑制心肌细胞凋亡等环节发挥抗心肌缺血作用。为了探讨人参皂苷单体Rb1对缺血心肌细胞的直接作用,本项研究采用酶解加机械分离的方法,取得了具有正常生理活性的耐钙心室肌细胞,通过模拟缺血环境,应用全细胞膜片钳技术观察Rb1对缺血心室肌细胞动作电位(AP),L-型钙通道电流(ICa-L),ATP敏感钾通道电流(IKATP)的影响,从而进一步阐明其对缺血心肌细胞保护作用的分子机制,为临床应用提供理论依据。 1.耐钙心室肌细胞的分离 采用Langendorff 灌流法,先用台氏液灌流30s ,再用无钙台氏液灌流5-7min, 其后换含胶原酶0. 16-0.20 g/ L 的酶液消化约8-10min,剪下心肌组织,KB液中37 ℃剪碎吹打,温育5min后,低速离心1min,换液后进行膜片钳实验,液体均用O2饱和,温度控制在37℃。结果:注意控制水、酶、温度等各种因素后,可得到杆状、横纹清晰、膜良好的耐钙心肌细胞。 2.人参皂苷Rb1对豚鼠心室肌细胞动作电位的影响


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