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含硒单链抗体对细胞的防护作用及半导体纳米粒子对生物分子的标记

王楠  
【摘要】:谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是生物机体内重要的抗氧化酶之一,它可消除机体内的过氧化氢及脂质过氧化物,具有较大的潜在药用价值。但由于天然GPX来源有限、稳定性差,不利于大规模制备及其应用。我室利用基因工程法成功表达了含有谷胱甘肽结合位点的单链抗体,并用化学突变法得到了含硒单链抗体酶,通过采用新的表达载体等方法实现了含硒单链抗体SescFv2F3的大量制备。本文从细胞水平探讨了SescFv2F3对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用——以H2O2为自由基损伤因素,作用于体外培养的小鼠乳鼠心肌细胞,进一步确认了具有GPX活性的单链抗体酶清除自由基的抗氧化生物学活性,并进一步探讨了可能的机制,为开发预防和治疗由ROS介导的疾病的有效药物作准备。 半导体量子点(QDs) 近几年来已在众多学科上产生了很大影响。作为荧光探针,QDs 的光学特性比荧光分析法中常用的有机染料具有明显的优越性。近年来,随着研究的不断深入、人们对量子点性质的认识逐渐加深以及制备工艺的提高,量子点在生物学研究中的作用越来越大。本文对水相合成的具有较高发光效率的水溶性CdTe 纳米粒子的光谱性质和稳定性进行了测定;在交联剂EDC 的作用下通过共价键结合方式用该纳米粒子标记牛血清白蛋白,并通过荧光光谱和SDS-PAGE 加以验证;在选定的pH 值条件下,通过静电相互作用机理,使其与带正电荷的GPX 模拟物―生物小肽相结合,并研究了其在小鼠体内的分布情况。本文建立的方法将为纳米粒子的生物学应用奠定基础,同时也研究具有GPX 活性的模拟物-生物小肽的作用机理提供一种新的手段。


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