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人骨髓间充质干细胞向造血细胞分化潜能的研究

陈晓  
【摘要】:骨髓间充质干细胞(MSC)是一种具有多向分化潜能的干细胞,在体外培养扩增且能长期维持其遗传性状稳定。造血干细胞移植(HSCT)作为一种重要的生物或细胞治疗,尽管已取得了很好的临床疗效,但供源不足、不能在体外大量扩增等方面原因使得HSCT 的应用仍受多方面的限制。那么,人骨髓MSC(hMSC)能否分化为造血细胞?需要那些必要的条件?移植后能否进行造血重建?针对上述问题,本研究首先分离人骨髓MSC,建立大规模培养及扩增体系,并对其生物学特性进行检测。然后利用小鼠胎肝基质细胞条件培养液、造血因子,对其进行体外诱导分化,其次以绿色荧光蛋白转染hMSC , 获得稳定表达绿色荧光蛋白的hMSC (hMSC/EGFP)。最后以hMSC 和hMSC/EGFP 为供体细胞,亚致死剂量射线照射后的裸鼠为受体,绿色荧光蛋白作为示踪,通过免疫组化、流式细胞术等方法观察hMSC 的体内造血分化潜能和造血重建能力,结果表明所分离、培养及扩增的hMSC 均一性好,具有多潜能成体干细胞特性。在体外,胎肝基质细胞条件培养液可诱导hMSC 分化为具有造血干/祖细胞特性的细胞。hMSC 能在亚致死剂量射线照射的裸鼠骨髓中植入并分化表型为人CD34+的造血干/祖细胞。


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