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1-磷酸鞘氨醇在急性心肌梗塞并发心律失常发生中的作用的实验研究

葛敬岩  
【摘要】:1-磷酸鞘氨醇(S1P)是细胞膜磷脂类代谢的中间产物之一。在心肌梗塞时,由于血小板的聚集与释放反应,可生成大量的S1P,心肌细胞存在对S1P 敏感的G-蛋白耦联受体;S1P 与急性心肌梗塞并发心律失常的关系尚未见报道。 本实验是以体表心电图为指标,从器官水平上观察到增高心肌梗塞局部心肌组织中的S1P 浓度可导致心脏期前收缩的发生率增加,其作用可被G-蛋白阻断剂PTX 所阻断。以急性分离的豚鼠心室肌细胞的动作电位参数为指标,应用电流钳技术,从细胞水平上观察到S1P 可降低心肌细胞静息电位(RP)水平,降低动作电位最大上升速率(Vmax)和动作电位幅度(APA),延长50%和90%的复极化动作电位时程(APD50,APD90)。应用全细胞膜片钳技术,在细胞水平上观察到S1P 可增加心室肌细胞Ca2+通道电流的幅值,其作用可被PTX 和PKC 阻断剂Calphostin C 所阻断;利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察到S1P 可使心肌细胞内游离Ca2+浓度增加,并且可被PTX 部分阻断。本实验还观察到,S1P 可降低心室肌细胞K+通道和Na+通道电流的幅值,亦可不同程度的被PTX 和Calphostin C 所阻断。上述实验结果提示,在心肌梗塞时,①S1P 通过增加细胞内游离钙离子浓度,可能诱发钙超载而产生迟后除极,导致心律失常的发生;②S1P 能够降低心肌细胞膜对K+的通透性,使RP 水平下降,容易导致异常节律的产生;③S1P可降低心肌细胞动作电位的Vmax和APA,抑制Na+通道电流,使兴奋的传导速度减慢而容易引起折返激动的发生;④S1P 的上述作用可能是通过膜受体—G-蛋白—PKC 途径介导的。 本文首次以体表心电、心肌细胞动作电位参数和膜电流记录、细胞内游离钙离子浓度测定等多种实验技术,从器官、细胞和分子多个水平,系统观察了S1P 对心肌的作用,为心肌梗塞并发心律失常的发生机理提供了


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