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防御素Defcr4和Mcp-1基因在牛乳腺中表达的研究

肖安东  
【摘要】:哺乳动物防御素是近年来发现的广泛存在于哺乳动物体内的一类阳离子多肽,不仅具有广谱抗微生物作用,而且还能杀伤多种肿瘤细胞,其潜在的药用价值巨大。本研究利用基因工程原理及现代分子生物学实验技术,通过合成和反转录分别克隆了鼠小肠隐窝防御素Defcr4 cDNA 和兔巨噬细胞防御素Mcp-1 cDNA,构建了防御素牛乳腺特异性表达载体pBC1-neo-Defcr4 和pBC1-neo-Mcp-1,并分别在牛乳腺中进行了表达实验。结果显示pBC1-neo-Defcr4 质粒在牛乳腺中得到正确表达,经反相高效液相色谱法分离,在牛乳汁中纯化出具有抗菌活性的Defcr4,并经质谱分析确认其分子量与理论值相符。证明本实验构建的牛乳腺特异性表达载体pBC1-neo-Defcr4 是合理有效的,为进一步构建防御素牛乳腺生物反应器和防御素的研究与应用奠定了基础。


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