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生长激素释放因子和垂体腺苷酸环化酶激活肽基因的共表达

刘松财  
【摘要】:生长激素释放因子(GRF)和垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)都是由下丘脑合成并分泌,是存在人和动物体内的生物活性物质,促进垂体生长激素(GH)的合成与分泌是其共有的生理功能。二者对提高动物的生长速度和畜牧业的发展具有重要意义。 本研究人工合成了PACAP 和GRF 基因,构建了pIRES1-GRF-PACAP、pIRES1-PACAP、pIRES1neo -GRF 真核表达载体;三种真核表达载体在CHO 细胞瞬时表达,经RT-PCR、Dot-ELISA、Western blot 检测结果阳性,同时证明表达产物具有促进IGF-1 的分泌作用; 以PLGA 为载体,采用复乳-液中蒸发法制备了重组质粒微球,分别给小鼠和獭兔肌注质粒微球结果表明,实验组动物累积增重与生理盐水组比差异显著,GRF 和PACAP 双基因质粒微球组促生长效果优于单基因质粒微球组,双基因质粒微球组动物血清中IGF-1 的浓度高于生理盐水组和单基因组。 以上实验结果表明,微球介导的双基因在提高动物体内IGF-1 浓度和生长速度方面明显优于生理盐水组,同时也高于单基因组,首次证明二者在体内具有协同促生长作用,为利用基因转染技术提高动物生产性能开辟了一条新途径。


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