收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究

郑伟  
【摘要】:本研究从中国鲎血细胞RT-PCR 扩增抗菌肽基因,经改造构建原核和真核表达载体,并在大肠杆菌和酵母菌中诱导表达。用Tris-Tricine SDS-PAGE 检测并进一步纯化表达产物,经体外生物活性测定表明,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、伤寒沙门菌等具有抑菌作用,尤其对水霉的抑菌效果显著,抑菌环达35mm;对人恶性黑色素瘤细胞(A375)、人宫颈癌细胞(HeLa)有毒性,使其脱离细胞培养瓶壁变成球形,还出现细胞碎片。而对正常鸡胚成纤维细胞(CEF)、猪肾细胞(PK)和地鼠肾细胞(BHK)的生长无影响。同时,还进行了表达中国鲎抗菌肽的基因工程酵母菌在感染高致病性大肠杆菌的雏鸡体内治疗,获得与常规药物羟氨苄青霉素相同的疗效。本项研究弥补了从天然中国鲎中提取抗菌肽缺陷,获得了具有生物学活性的抗菌肽基因工程原核和真核表达株,为用基因工程方法生产无毒副作用、无有害残留、不易使细菌产生耐药性的具有多种生物活性中国鲎抗菌肽奠定了基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 岳昌武;莫宁萍;刘坤祥;凌锌;曾霓;;抗菌肽的结构特点·作用机理及其应用前景[J];安徽农业科学;2008年05期
2 郑伟;韩文瑜;韩俊友;张钫;雷连成;乔红伟;;中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其抗菌活性[J];中国兽医学报;2007年02期
3 王芳,张双全,戴祝英,徐贤秀;昆虫抗菌肽的基因克隆与表达[J];自然科学进展;1999年S1期
4 陈轶群;曹云鹤;;抗菌肽研究进展[J];中国畜牧杂志;2009年11期
5 张召兄;潘晓亮;任耀军;;抗菌肽概述及抗菌分子机理的研究进展[J];中国畜牧兽医文摘;2007年04期
6 杜剑平,张青,陈正堂;人β-抗菌肽与基因工程[J];东南大学学报(医学版);2003年05期
7 莫索;刘欢;贺元欣;魏刚;王彦;王会岩;;鸡β-防御素的研究进展[J];吉林医药学院学报;2011年01期
8 董雪吟,邱奇峰,周爱武,徐贤秀;非共价偶联法制备抗菌肽CMIV抗体[J];南京铁道医学院学报;1996年03期
9 韩润林,孙庆林,额尔敦夫,李立民;黄粉虫幼虫中抗菌肽的诱导及其抗菌活性的初步研究[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);1998年03期
10 王芳,张双全;抗菌肽抗癌作用机理的研究进展[J];自然科学进展;1999年02期
11 叶星,白俊杰;抗菌肽的研究及其在水产上的应用前景[J];大连水产学院学报;2000年04期
12 高建,戴祝英,陈溥言;抗家蚕抗菌肽单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立[J];南京师大学报(自然科学版);1996年02期
13 许玉澄,张双全,戴祝英;家蚕抗菌肽的抗癌作用[J];动物学研究;1998年04期
14 宋春满,雷朝亮;昆虫免疫的研究(二)[J];湖北植保;1999年05期
15 曾辉明,黄俊生,程立生;昆虫抗菌肽的研究进展[J];热带农业科学;2002年06期
16 唐向辉,屈贤铭;柞蚕抗菌肽D中精氨酸、赖氨酸和色氨酸等氨基酸残基的化学修饰[J];动物学研究;1988年01期
17 谢维,邱奇峰,陈江宁,马忠,徐贤秀;中国家蚕抗菌肽CMIV基因的合成与克隆[J];南京大学学报(自然科学版);1996年03期
18 韩新燕,汪以真,许梓荣;哺乳动物抗菌肽的研究进展[J];中国兽医学报;2002年02期
19 杨绒,陈松林;水产动物抗菌肽的研究进展[J];生物技术通报;2005年02期
20 赵红霞 ,詹勇 ,许梓荣;动物抗菌肽及其基因工程[J];江西饲料;2002年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
2 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
3 王静;祝平;;抗菌肽在养殖生产中的应用研究进展[A];2008山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2008年
4 梁延彬;;抗菌肽在养猪业中的应用进展[A];2011猪免疫抑制病防控与营养保健技术专题论坛会刊[C];2011年
5 明双喜;王沂蒙;刘艳;江国托;;抗菌肽作用机理及其在生产方面的研究进展[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
6 张东玲;黄文树;粱英;关瑞章;宋凯;;日本鳗鲡肝脏抗菌肽的分离纯化[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
7 陆婕;钟雅;柳林;付康;陈正望;;家蝇蛆抗菌肽提取工艺研究[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
8 马清泉;单安山;董娜;曹艳萍;;新型抗菌肽的分子设计和活性检测[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
9 彭兵;张树斌;王立安;;枯草芽孢杆菌菌株A抗菌肽的分离纯化及抗真菌机理[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
10 袁天虎;张欣;胡泽汗;王芳;雷鸣;;抗菌肽Piscidin 1及其突变体稳定性的动力学研究[A];中国化学会第28届学术年会第13分会场摘要集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑伟;中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究[D];吉林大学;2005年
2 王远强;小分子抗菌肽的虚拟组合设计、筛选与效应研究[D];西南大学;2012年
3 刘黎;抗菌肽活性的力学调控机制研究[D];华南理工大学;2012年
4 王秀青;六种天蚕素类基因工程抗菌肽的研制及应用[D];南京农业大学;2007年
5 刘蕊;抗微生物活性肽的资源发掘和功能研究[D];南京农业大学;2011年
6 侯峰;光滑爪蟾(Xenopus laevis)皮肤抗菌肽的筛选及其相关研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
7 周杰;中国林蛙抗菌肽RTCI的结构功能研究[D];吉林大学;2007年
8 鄢然;1b型HCV研究模型的建立及蝎源抗菌肽抑制HCV感染的初步探讨[D];武汉大学;2010年
9 王宇光;抗菌肽CMIV基因突变体的设计、合成和表达的研究[D];华南热带农业大学;2002年
10 张卫民;幽门螺杆菌抗菌肽抗菌及抗肿瘤作用的基础研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 林文学;仔猪抗菌肽PR-39基因表达随日龄的变化及不同锌源对其表达的影响[D];浙江大学;2003年
2 邱晓燕;舍蝇(Musca domestica vicina)幼虫抗菌肽的提取及其生物活性的初步研究[D];厦门大学;2001年
3 舒慕娅;抗菌肽Selysin的表达及其对肝癌细胞HepG2的毒性作用[D];华中科技大学;2009年
4 潘新民;Hepcidin、铁和炎症相互关系的初步研究[D];浙江大学;2011年
5 曾雪嘉;转不同抗菌肽和几丁质酶基因烟草的抗病性研究[D];西南农业大学;2004年
6 田晓乐;林蛙抗菌肽的制备与制剂研究[D];吉林大学;2004年
7 王红叶;α-螺旋型多肽对不同肿瘤细胞的抗癌活性研究[D];吉林大学;2010年
8 陈道煌;基于Loloatin C的系列假环多肽的设计合成及抑菌机理的初步研究[D];汕头大学;2010年
9 杨细媚;抗菌肽天蚕素A截短肽的高效表达、分离纯化及抗体制备[D];重庆医科大学;2009年
10 李云松;猪血液中抗菌肽成熟肽pMAP-23与pG-2基因的克隆及原核表达[D];吉林农业大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 金永红;医院缺乏知识产权保护意识[N];健康报;2006年
2 金利;基因工程国家一类新药haFGF获证书[N];科技日报;2007年
3 记者 杨维忠 通讯员 吴延华;东阿阿胶推出溶栓基因工程药[N];中国知识产权报;2007年
4 海文;美探索基因工程治孤独症方法[N];中国医药报;2008年
5 本报记者 李远方;通威基因工程打造现代渔业样板[N];中国商报;2005年
6 徐敏;基因工程妙解中药资源“困境”[N];解放日报;2008年
7 宋张泽宇;我国基因工程药物领域又一新突破[N];大众科技报;2007年
8 贾士荣;基因工程——农业进步的助推器[N];中华合作时报;2002年
9 中国科学院动物研究所研究员 沈孝宙;关于GMO的对话[N];中国国门时报(中国出入境检验疫报);2001年
10 ;中国基因工程现状与展望[N];证券时报;2000年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978