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bpti基因的克隆及其在烟草中的表达

耿学军  
【摘要】:为实现bpti 基因在烟草中的表达,本研究首先克隆了bpti 基因并重组构建了植物双元表达载体pBI121-bpti,通过冻融法将其转入根癌农杆菌EHA105,用根癌农杆菌介导的叶盘法将目的基因导入烟草植株,卡那霉素为筛选选择压,获得了卡那霉素抗性的再生烟草植株,PCR 扩增检测目的基因并结合酶分析法、SDS-PAGE 电泳,证明bpti 基因已整合到烟草基因组中并得以表达,SDS-PAGE 电泳显示样品相对分子量约为6.5kDa,与BPTI 标准品相对分子量吻合,证明基因在烟草中正确表达。


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