小肽免疫抑制剂抑制大鼠肝移植排斥反应的实验研究

【摘要】：急性排斥反应是器官移植后移植物失功的最主要的因素,应用免疫抑制剂的目的是为了降低急性排斥反应的发生率,然而许多有效的免疫抑制剂都有着广泛的毒性,用于治疗的单克隆抗体因识别大部分的外周T细胞而产生广泛的、非特异性的免疫抑制。一个理想的免疫抑制剂应选择性地作用于T细胞,这些T细胞是参加特定的免疫反应的,而移植中更具有专一性的免疫抑制剂的靶目标应该是IL-2R,因为它的表达是同种异体反应性T细胞激活的一个重要步骤。IL-2R有3个亚基:α、β和γ,其中;α链只表达在器官移植的T细胞表面,而在静息T细胞表面不表达,这为新型免疫抑制药物的开发研制提供了一条途径。 第一部分实验中,采用标准的Fmoc保护氨基酸Nα氨基的固相合成法合成了小肽XCSSXX,经HPLC纯化,并通过质谱检测确定其分子量。为了检测该小肽的免疫抑制活性,分别以ConA诱导的淋巴细胞转化实验和IL-2诱导的淋巴母细胞转化实验为体外模型,观察小肽对细胞转化的影响。结果表明合成的小肽是通过抑制IL-2和IL-2R的结合实现其免疫抑制作用的。 第二部分实验中,以BN至Lewis大鼠原位肝移植为模型,分别将不同剂量的小肽于术后1-7天注入受体鼠腹腔内,观察各组大鼠存活时间,移植肝组织病理改变及各组细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IFN-Y的变化。我们观察到一定剂量的小肽能够抑制大鼠肝移植的排斥反应,并可引起Th1细胞向Th2细胞的免疫偏离。