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缝隙连接对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响

韩冬  
【摘要】:目的:观察脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的变化规律,探讨干预缝隙连接功能对血脑屏障通透性变化的影响并分析其可能机制。 方法:①将体重250g~300g的雄性Wistar大鼠随机分成假手术组和缺血再灌注组。线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。分别于缺血2h再灌注1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h,采用荧光分光光度法测定脑组织伊文思蓝含量,来观察血脑屏障的通透性的改变。②应用激光共聚焦显微镜技术观察缝隙连接蛋白Cx43在缺血再灌注半暗带毛细血管周终足上量及分布情况的变化。③取伊文思蓝漏出最多的时间点,设立假手术组、缺血再灌注组、辛醇干预组和DMSO溶剂对照组,分析脑组织内伊文思蓝含量以观察辛醇对血脑屏障通透性的影响。 结果缺血2h再灌注3h脑组织伊文思蓝含量开始增加,再灌注24h达高峰。激光共聚焦显微镜发现缝隙连接蛋白Cx43在脑内广泛分布,在脑内毛细血管周围的星形胶质细胞终足上分布密集。在缺血再灌注后半暗带内,终足上的Cx43分布变化、聚集成较大斑块。在缺血2h再灌注24h给予辛醇干预,脑组织伊文思蓝含量低于手术组,二者有显著性差异。 结论血脑屏障的通透性在缺血再灌注3h开始上升,再灌注24h达高峰,再灌注72h有所下降但仍高于正常水平。缝隙连接在脑缺血再灌注后半暗带终足上分布变化明显,可能加重了血脑屏障通透性的增加。辛醇阻断缝隙连接可以降低脑缺血再灌注血脑屏障的通透性,从而起到减轻脑水肿的作用。


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