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CMV 2b蛋白的原核表达纯化及融合策略增强抑制子活性初探

张剑锋  
【摘要】:RNA沉默(RNA silencing)是一种在真核生物体内普遍保守的,发生在RNA水平的,基于核酸序列特异性的相互作用来抑制基因表达的调控机制。在植物体内也称为转录后基因沉默(Post transcriptional genesilencing,PTGS),在动物体内称为RNA干扰(RNA interference,RNAi),而在真菌内则称为基因压制(gene quelling)。RNA沉默主要存在2类生物学效应:一类是指对病毒、转基因和转座子等外来入侵核酸序列特异性的RNA降解:另一类是对内源mRNA转录和翻译的调控。大量研究己表明双链(ds)RNA是RNA沉默起始的关键分子,dsRNA的大量积累诱导RNA沉默的启始。dsRNA首先被降解为不同长度的小RNA,然后这些小RNA整合入RNA诱导的沉默复合体(RNA—induced silencing complex,RISC),并引导RISE降解同源RNA。 在与寄主长期进化过程中,许多植物病毒为了成功侵染,已演化通过编码RNA沉默的抑制子(suppressor)来克服这种防御反应。超过20种RNA沉默的病毒抑制子己被鉴定,抑制子蛋白的结构和功能多样性也反映了在进化过程中病毒为了适应不同的寄主,利用不同的蛋白质在RNA沉默途径的不同步骤,抑制寄住的防卫反应,可能的作用方式包括:1)抑制病毒siRNA的产生:2)阻碍siRNA整合入RISC:3)干扰RISC降解同源mRNA。 黄瓜花叶病毒(CMV)是黄瓜花叶病毒属(Cucumovirus)的典型成员。该病毒寄主


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