收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

应用RNAi技术沉默STAT3基因诱导乳腺癌细胞凋亡的体内外实验研究

王禹  
【摘要】:目的探讨应用RNAi技术沉默信号转导子与转录活化子3(STAT3)基因对人乳腺癌细胞的影响。方法①应用免疫组化SABC法检测STAT3在人乳腺癌组织中的表达;②以STAT3已知序列为靶点,构建psilencer1.0-U6-stat3-siRNA重组质粒;③通过体外、体内实验,研究重组质粒转染MCF-7细胞及裸鼠瘤内注射重组质粒后STAT3的表达状况及对细胞凋亡的影响。结果①免疫组化结果显示,STAT3在人乳腺癌组织中的阳性表达率及染色强度明显高于正常组织;②成功构建psilencer1.0-U6 -stat3-siRNA重组质粒,并且应用限制性内切酶Hind III进行消化,证实重组质粒不能被消化;③重组质粒转染MCF-7细胞后,Western blot和RT-PCR结果证实,STAT3表达受到很大抑制;流式细胞仪检测,凋亡细胞丫啶橙/溴化乙锭染色实验及MTT实验结果提示细胞出现凋亡,生长明显受到抑制;④体内研究结果显示psilencer1.0-U6-stat3-siRNA组荷瘤裸鼠肿瘤生长明显受到抑制,瘤组织免疫组化结果显示,瘤块中心出现大面积的细胞坏死以及核固缩等细胞凋亡征象,中心区STAT3表达呈阴性,周边区呈阳性的特殊表现,同时根据图象分析仪测得的灰度值显示,本组瘤组织促凋亡基因Bax阳性表达明显增强,并且Western blot及RT-PCR进一步提示, STAT3的表达明显减弱。结论应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低人乳腺癌细胞中STAT3的表达,导致细胞凋亡进而抑制肿瘤的生长。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 程琳,王杉,叶颖江,张嘉庆,乔新民,杨德启,崔志荣;癌基因Stat3在人乳腺癌发生发展中的作用[J];中华普通外科杂志;2004年04期
2 李相良;张灵;张慕淳;马雪涛;高丽芳;郭万松;赵燕颖;潘玉琢;孔祥波;徐德启;赵雪俭;;利用siRNA技术沉默膀胱肿瘤STAT3基因及促进凋亡的机制探讨[J];中国老年学杂志;2008年02期
3 程甜甜;杨贤子;熊奎;骆志国;谢伟;冯茂辉;;FAP-1在乳腺癌中的表达及意义[J];郧阳医学院学报;2008年05期
4 尹一恒;章翔;;STAT3与脑胶质细胞瘤[J];中华神经外科疾病研究杂志;2008年05期
5 陈莉;姜军;杨新华;范林军;张毅;陈显春;;ERβ1对乳腺癌MCF-7细胞Efp基因表达的抑制作用[J];中华乳腺病杂志(电子版);2007年06期
6 孟刚,李庆林,陈志武,马传庚;紫杉醇诱导MCF-7凋亡与bcl-2及bax的关系[J];中国药理学通报;2001年03期
7 王禹,张颖超,韩喜春,关文曾;乳腺癌组织中癌基因STAT3的表达及临床意义[J];中国老年学杂志;2005年09期
8 何文琼;钱晓萍;刘宝瑞;;STAT3与肿瘤个体化治疗[J];医学研究生学报;2009年09期
9 杜钢军;林海红;谢松强;;阳和汤血清对MCF-7细胞增殖、分化及凋亡的影响(英文)[J];河南大学学报(医学版);2007年01期
10 孙梅;刘洪义;张兴义;李玉林;;MK基因特异性siRNA对乳腺癌细胞凋亡的影响[J];中国实验诊断学;2009年04期
11 赵军艳;姚树坤;殷飞;;苦参碱对肝癌细胞增殖凋亡及stat3、stat5基因的影响[J];天然产物研究与开发;2006年02期
12 王海琪,董长垣,陈东娥,陈晓,郭淑芳,刘文培;BTV及其dsRNA分子诱导IFN产生和细胞凋亡[J];中国病毒学;2005年03期
13 马向涛,王杉,叶颖江,社如昱,崔志荣;Stat3及其靶基因产物与结直肠癌恶性程度关系的研究[J];癌症;2003年11期
14 符伟军,黄君健,邵国兴,徐兵,王禾,黄翠芬;端粒酶反义RNA转染促进膀胱癌T24细胞凋亡的研究[J];中华泌尿外科杂志;2002年01期
15 王知力,王文亮,郭双平,曾建新,骆文静;PTEN基因对人肝癌细胞系HHCC作用的研究[J];临床与实验病理学杂志;2002年02期
16 贺青卿,单礼成,范西红,刘少兰,孙晓明;Fas抗原在乳腺癌组织中的表达[J];中国癌症杂志;2000年01期
17 刘继红;田晓峰;柳勤龙;;乳腺癌中生存蛋白基因的表达及其意义[J];医师进修杂志;2005年24期
18 王晨,周良辅,沈兆忠,郑颂国,罗建民;转染TNFα基因诱导恶性胶质瘤细胞凋亡的研究[J];中国临床神经科学;1999年04期
19 孙颖,刘明,李恒力,韩水平,徐长福,周党侠,雷霆;乳腺癌组织中巨噬细胞浸润与bcl-2,bax表达的关系[J];第四军医大学学报;2003年13期
20 王珊,金先庆,杨纯正;mdr1基因转染K562细胞株的高效及安全性实验[J];重庆医科大学学报;2003年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王震;刘乾;陈琦;朱荣;朱虹光;;NDRG1基因与乳腺癌转移的关系及其转染对乳腺癌细胞株增殖及侵袭力的影响[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
2 王英丽;朱丽娜;刘力华;;原癌基因HER-2超表达可能是老年性乳腺癌的重要病因学因素[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2011年
3 高岩;郑敏;;Id mRNA在乳腺癌中的表达与彩色多普勒超声表现的相关性[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
4 陈英剑;孙晓明;胡成进;闻新棉;;乳腺癌组织KLK5 mRNA的表达水平及其与临床病理特征的关系[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
5 丁春艳;桑梅香;单保恩;;MAGE-A4在乳腺癌组织和细胞系中的表达及对乳腺癌细胞凋亡的影响[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年
6 吴鸿雁;余慧萍;樊祥山;孟凡青;周强;;乳腺癌组织中DNA-PKcs表达及其与临床病理特征关系的研究[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
7 黄超;赖建华;杨慧;李琳;余敏;谭德勇;;ARD1基因在乳腺癌中的表达研究[A];中国遗传学会七届一次青年研讨会暨上海高校模式生物E——研究院第一届模式生物学术研讨会论文汇编[C];2005年
8 杨开颜;俞康;李剑敏;黄卡特;周韧;;乳腺癌组织中P51基因的表达及其意义[A];2005年浙江省肿瘤外科学术会议论文汇编[C];2005年
9 赵缜;刘维燕;陈前;谢蕴;浦文;;Rab4和Rab22在乳腺癌中的表达及意义[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年
10 郑春梅;王薇;卢晓潇;李丹;;乳腺癌47例血管密度与TF相关性分析[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王禹;应用RNAi技术沉默STAT3基因诱导乳腺癌细胞凋亡的体内外实验研究[D];吉林大学;2006年
2 付长峰;胰岛素样生长因子1真核细胞表达质粒的构建及其对神经胶质瘤细胞和大鼠脊髓损伤模型神经细胞凋亡影响的实验研究[D];吉林大学;2006年
3 孙梅;中期因子靶向siRNA对乳腺癌生物学行为的影响[D];吉林大学;2009年
4 王弘;p53诱导基因Unc5H4在神经母细胞瘤发生发展的作用机制[D];中国医科大学;2008年
5 连易水;肿瘤抗原MAGE-A11在乳腺癌组织中的表达及对雌激素依赖型乳癌细胞增殖的影响[D];河北医科大学;2012年
6 郭慧;RNAi沉默STAT3基因对人喉鳞癌化疗增敏作用的实验研究[D];吉林大学;2008年
7 王杰;Duffy抗原趋化因子受体(DARC)抑制人乳腺癌细胞的生长和肺转移[D];复旦大学;2006年
8 何英;抗骨桥蛋白抗体治疗乳腺癌骨转移的实验研究[D];中南大学;2007年
9 刘国辉;错配修复基因、抑癌基因及微卫星不稳定性与乳腺癌相关性研究[D];吉林大学;2008年
10 毕晓峰;乳腺癌相关蛋白表达分析及与临床预后关系的研究[D];中国协和医科大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘晓华;hTERT/PUMA基因联合作用对MCF-7细胞增殖抑制和凋亡的研究[D];泸州医学院;2011年
2 孙关;STAT3介导反义miR-21调控hTERT表达抑制胶质瘤细胞生长[D];南京医科大学;2011年
3 郑炜望;消癌平注射液及其与奥沙利铂和恩度联合对STAT3信号通路及相关蛋白影响的实验研究[D];南京中医药大学;2010年
4 杨娜娜;小鼠白血病抑制因子基因的克隆、表达及维持鸡胚胎干细胞未分化状态的研究[D];山东农业大学;2005年
5 王芳;微量元素铜对人口腔癌细胞的影响[D];大连医科大学;2005年
6 宋旗;β-catenin反义寡核苷酸对MCF-7细胞增殖和紫杉醇敏感性的影响[D];华中科技大学;2007年
7 王波;STAT3的表达及其基因沉默对甲状腺癌增殖侵袭的影响[D];福建医科大学;2010年
8 李峰;Akt、mTOR和STAT3在脑胶质瘤中的表达及其意义[D];郑州大学;2010年
9 冯铭恩;STAT3及CD147在前列腺癌中的表达研究[D];南昌大学;2010年
10 赵秀云;STAT3信号传导通路与复发性自然流产关系的研究[D];吉林大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 殷永哲;核酸与细胞的生理性凋亡[N];保健时报;2009年
2 冯世容;CD95基因转染可提高胰腺癌对化疗药物敏感性[N];中国医药报;2001年
3 张中桥;bag-1及bcl-2可为乳腺癌早诊标记[N];中国医药报;2004年
4 白毅;上海创建大规模细胞DNA转染技术平台[N];中国医药报;2005年
5 张中桥;NDRG2可诱导肝癌细胞HepG2凋亡[N];中国医药报;2004年
6 张中桥;反义Cortactin基因能抑制肝癌细胞转移[N];中国医药报;2006年
7 吴志;肿瘤治疗新思路:诱导肿瘤细胞自动凋亡[N];中国医药报;2009年
8 吴一福;PTFE血管材料可携载VEGF基因转染[N];中国医药报;2006年
9 高国起;膀胱癌基因治疗新技术[N];科技日报;2003年
10 吴军 杨太成;主动特异性免疫疗法治疗肿瘤[N];中国中医药报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978