收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

H-FABP表达、单克隆抗体制备、测定方法建立及临床应用研究

侯巍  
【摘要】:本研究的目的是通过建立H-FABP的测定方法,观察其在心血管疾病中的应用价值。通过大肠杆菌和毕赤酵母表达并纯化了重组人H-FABP,将其免疫BALB/c小鼠,与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得抗人H-FABP单克隆抗体。建立了人血清H-FABP ELISA测定方法并进行了初步的临床应用。 1 根据已报道的人H-FABP基因序列,采用RT—PCR的方法从人心肌中获得H-FABP基因。将所得的PCR产物插入原核表达载体pQE30、pBV220和酵母pPICZαA得重组质粒(pQE-H-FABP、pBV-H-FABP和pPICZ-H-FABP)并转化大肠杆菌M15、DH5α和毕赤酵母X-33,通过IPTG诱导、温度诱导和甲醇诱导,成功表达并纯化了三种不同形式的人H-FABP。首次报道通过大肠杆菌DH5α和毕赤酵母X-33表达H-FABP。 2 成功的制备并纯化了7株抗人H-FABP单克隆抗体,通过鉴定,从中筛选出4D7、9H10两株亲和力高、空间位点不同的单克隆抗体。 3 建立了人血清H-FABP夹心ELISA测定方法,对其精密度、灵敏度、线性范围、稳定性进行了检测。并与进口同类方法试剂盒进行比较(r=0.99)。解决了目前人血清H-FABP测定 4 首次将H-FABP与MYO、cTnI、CK-MB联合测定应用于AMI诊断。解决了AMI早期无国产试剂盒的问题。 5 首次将H-FABP与cTnI、CK-MB、CRP联合测定应用于UA诊断和与预后观察。 6 证明了H-FABP在AMI和UA早期诊断中的作用。 7 为建立快速AMI早期诊断方法奠定了基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 蒋性凡;周继文;黄翠英;任继明;杨守纯;;鼠单克隆抗HBc检测病人血清抗HBc应用的研究[J];现代免疫学;1985年03期
2 黎燕;赵薇薇;沈倍奋;孙英勋;王文香;;抗人重组肿瘤坏死因子(rHTNFα)单克隆抗体的研制[J];生物工程学报;1991年02期
3 张兴民,李敏,杨廷彬;抗DNA单克隆抗体的应用[J];中国免疫学杂志;1990年06期
4 武彪,黄宇烽,李保全,物毓华,武建国;人μ链单克隆抗体的研制及临床应用[J];免疫学杂志;1989年02期
5 许淑芬;侯巍;谭岩;杨述红;车媛媛;王智昊;;人H-FABP单克隆抗体制备和纯化及其特性鉴定[J];中国实验诊断学;2008年11期
6 吴斌;;抗迟缓爱德华氏菌单克隆抗体制备及初步鉴定[J];福州大学学报(自然科学版);2011年01期
7 马尽国;;抑制人唾液α-淀粉酶的单克隆抗体[J];国际检验医学杂志;1988年06期
8 王德斌,陈智周,范振符,曹明华,朱争艳,苏萍;抗多胺单克隆抗体的制备和临床应用 I.抗精脒单克隆抗体的产生和特性(简报)[J];中国医学科学院学报;1989年01期
9 宋凯;周佳菁;叶赛;彭海林;王升年;肖华胜;赵国屏;张庆华;;微孔板蛋白质芯片技术应用于单克隆抗体分型研究[J];中国生物工程杂志;2007年06期
10 谢光洪;于光;肖成蕊;牟俊;李小兵;张志刚;王哲;周晓翠;宋文学;;黄曲霉毒素B1免疫检测方法的新进展[J];中国畜牧兽医;2007年07期
11 冯志新;迟灵芝;刘茂军;王海燕;甘源;吴叙苏;邵国青;;猪肺炎支原体P46蛋白单克隆抗体制备[J];江苏农业学报;2010年02期
12 姚辉;聂新民;黄作良;;抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究[J];邵阳学院学报(自然科学版);2010年02期
13 黄敏;;“动物细胞融合与单克隆抗体”一节教学设计[J];生物学通报;2011年06期
14 徐志凯;汪美先;王海涛;姜绍谆;马文煜;;单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病人血清IgM和IgG抗体的研究(简报)[J];细胞与分子免疫学杂志;1986年Z1期
15 池信才;王军;鄢庆枇;苏永全;;大黄鱼病原副溶血弧菌单克隆抗体制备及其应用[J];海洋科学;2007年08期
16 向军俭,党瑛,刘尔翔,陈华粹;抗人C_3单克隆抗体的制备及其特性[J];中国医学科学院学报;1984年04期
17 徐金森;;甘草酸单克隆抗体在中成药分析中的应用[J];厦门大学学报(自然科学版);2008年S2期
18 张琳!430016,游上游,黄亦钧,胡远贵!430016,黄巍,杨军!430016;心肌钙蛋白T单克隆抗体制备及应用[J];中华检验医学杂志;2000年03期
19 肖玉春;邱海燕;王冰;顾玲;汪华;崔志刚;黄晓蓉;阚飙;景怀琦;徐建国;;小肠结肠炎耶尔森菌O∶9血清型特异性单克隆抗体筛选及其应用[J];中国媒介生物学及控制杂志;2005年06期
20 程宇;高宏雷;高玉龙;简子健;余嘉玲;王晓燕;王笑梅;;抗IBDV VP2单克隆抗体制备及其免疫学鉴定[J];新疆农业大学学报;2006年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 严红;王香菊;徐秀兰;张大安;;用Dot-ELISA方法检测腐败人血IgG和G1m(3)因子[A];第二次全国法医物证学学术交流会论文集[C];1998年
2 王香菊;徐秀兰;严红;蒯应松;陈艳;;抗人血红蛋白(Hb)单克隆抗体制备及其特性鉴定[A];第二次全国法医物证学学术交流会论文集[C];1998年
3 祭芳;李华;徐剑宏;史建荣;;抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇的抗体制备及其检测方法的建立[A];江苏省植物病理学会第十一次会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2008年
4 王香菊;徐秀兰;严红;蒯应松;;应用酶标21A_8单克隆抗体Dot-ELISA快速检测人IgG[A];第二次全国法医物证学学术交流会论文集[C];1998年
5 夏立新;Robotham Teuber Sathe Roux;;利用单克隆抗体鉴定腰果主要过敏原Ana o 2的一个IgE立体抗原表位[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年
6 王香菊;徐秀兰;严红;蒯应松;陈艳;;抗人免疫球蛋白IgG单克隆抗体制备及其特性鉴定[A];第二次全国法医物证学学术交流会论文集[C];1998年
7 喻翠翠;孟宪荣;栗绍文;梅仕林;张望;周蕾蕾;陈辉;毕丁仁;;猪结合珠蛋白的基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
8 冯慧;曾艳;伊德林;刘芙蓉;方瑾;宋今丹;;人大肠癌单克隆抗体的临床应用研究[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年
9 张勇;张惠珍;王树军;王颖;龙婷婷;葛海良;;肿瘤相关抗原OVA12单克隆抗体制备及其应用[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
10 孟祥昱;;血型单克隆抗体制备技术的研究进展[A];中国输血1999年年会暨纪念ABO血型发现100周年学术交流论文专辑[C];1999年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 侯巍;H-FABP表达、单克隆抗体制备、测定方法建立及临床应用研究[D];吉林大学;2006年
2 万忠海;抗PEA单抗和单链抗体制备及在绿脓感染中的应用[D];吉林大学;2008年
3 胡敏;载脂蛋白M重组蛋白和单克隆抗体的制备及其初步临床应用[D];中南大学;2008年
4 刘子泉;人源S100A1和S100B全基因合成、表达、单抗制备及其活性分析[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
5 唐琳;肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究[D];重庆医科大学;2005年
6 侯桂华;巨噬细胞移动抑制因子在同种移植排斥中作用及其机理的研究[D];山东大学;2004年
7 高勇;新型单克隆抗体荧光探针染料的合成及免疫荧光组织化学应用[D];西北大学;2006年
8 江敏;大鼠单克隆抗体的制备、鉴定、基因克隆、抗原分析以及药物偶联物的抗肿瘤作用研究[D];中国协和医科大学;1996年
9 秦迎松;人促血液血管细胞生成素(Haemangiopoietin, HAPO)单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年
10 吕大伟;抗RANKL单克隆抗体在大鼠类风湿性关节炎模型中的应用及RANKL转录调控的探索性研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 姚辉;抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究[D];中南大学;2010年
2 王建和;褪黑素单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[D];华中师范大学;2003年
3 李春媛;三聚氰胺单克隆抗体制备及其在ELISA检测中的应用[D];吉林大学;2009年
4 杨文涛;单克隆抗体治疗HFRS患者血清中鼠IgG及抗鼠抗体的检测[D];第四军医大学;2004年
5 凤敏华;细胞角蛋白-20单克隆抗体制备及在大肠癌检测中的初步应用研究[D];苏州大学;2010年
6 王鹏;人Ⅰ型丙氨酸氨基转移酶原核表达、表位分析及其抗体制备[D];重庆医科大学;2011年
7 曲勍;抗莱克多巴胺单克隆抗体制备与ELISA方法的建立[D];中国农业大学;2005年
8 刘思莹;抗牛γ-干扰素单克隆抗体制备和鉴定[D];东北农业大学;2009年
9 李岩松;环丙沙星单克隆抗体制备及其在ELISA中的应用[D];吉林大学;2005年
10 菅复春;牛隐孢子虫单克隆抗体制备及夹心ELISA方法的建立[D];河南农业大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 贾超时李德成;单克隆抗体产业研发项目将落户大庆[N];大庆日报;2008年
2 王晴;我国成功克隆世界首头转人基因奶牛[N];陕西科技报;2008年
3 小许;市领导会见美国生物医药巨头[N];无锡日报;2010年
4 姜海;英科学家发现单克隆抗体[N];科技日报;2007年
5 本报特约撰稿人 李朝;单抗:生物医药发展的主旋律[N];医药经济报;2006年
6 记者 项铮;赛诺菲巴斯德研制抗狂犬病单克隆抗体[N];科技日报;2008年
7 记者 杨俊坚;单抗药物:站在同一起跑线[N];医药经济报;2011年
8 张蕾;治疗用单克隆抗体[N];光明日报;2002年
9 李晓;“苏州系列”单克隆抗体走向世界[N];苏州日报;2008年
10 张骁束;梅英;单克隆抗体的研究进展[N];中国医药报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978