NGF诱导PC12细胞分化的蛋白质组学研究
【摘要】:目的研究NGF处理PC12细胞不同时间点6h和96h的细胞蛋白质表达谱变化筛选NGF信号转导相关蛋白以便深入理解NGF的生理功能和作用机制并为NGF的临床应用提供新线索方法建立NGF诱导PC12细胞分化模型并对此模型进行评估分别提取NGF处理6h和96h的细胞总蛋白应用DIGE系统分析上述两组细胞样品与相应对照组的蛋白质表达谱获得蛋白点表达差异信息运用MALDI-TOF质谱鉴定出差异蛋白质结果NGF处理6h后有7个蛋白点发生变化其中3个蛋白点表达降低4个点表达升高通过数据库检索鉴定出eEF-2 Rab GDIα和DPP等3种结构和功能各异的蛋白而NGF处理96h后有58个蛋白点发生变化通过质谱鉴定和数据库检索鉴定出NF-M NF-L VCP THα-tubulin 2 tubulinβ-15 RNA解旋酶annexinTM GST等10种蛋白讨论本实验首次应用先进的DIGE技术筛选NGF诱导PC12细胞分化相关蛋白并选取了6h和96h两个时间点进行研究旨在发现NGF诱导PC12细胞分化相关蛋白的动态变化本文分别探讨了各差异表达蛋白在NGF诱导PC12细胞分化过程中的可能作用其中DPP Rab GDIαVCP annexin RNA解旋酶等5种蛋白是以往NGF诱导PC12细胞分化研究中未曾报道过的这些蛋白尤其是早期差异表达的蛋白可能是NGF信号转导过程的新成员也可以成为药物治疗的新靶点本实验为研究NGF诱导PC12细胞分化的确切机制提供了新的重要的线索也为深入进行神经保护药物的研发提供了新线索
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