BMP-2和VEGF-165双基因共转染大鼠骨髓基质干细胞体内成骨的实验研究

【摘要】：因创伤及病理因素导致的骨缺损、骨不连的治疗,一直是一个棘手的难题。探索新的方法提高骨愈合和促进骨形成是治疗骨缺损骨不连的最佳途径。基因治疗的研究是最有前途的领域之一,故成为最近几年的研究焦点。具有提高骨愈合能力的各种因子已被研究,在众多骨生长因子中,骨形态发生蛋白(BMP)是其中最重要的一种,它已被公认为是目前最强的骨诱导因子,也是最有前途的。而骨组织的发育、改建、愈合均离不开血管生成,血管生成与早期骨形成密切相关。但关于VEGF是否是BMP诱导成骨过程中的必要条件,应用VEGF基因促进血管生成能否促进成骨、提高骨愈合未见报道,BMP基因和VEGF基因在成骨过程中的关系未见报道,是否给予外源性的VEGF能够进一步加速骨形成及愈合,是否影响骨形成和骨修复的其他重要环节,目前尚未研究清楚。本研究主要探讨VEGF和BMP在骨形成过程中的相互关系及对骨形成的作用,这样我们可以发现一个新的方法去提高骨愈合,修复骨缺损。本研究的设计正是通过观察BMP2基因及VEGF-165基因转染大鼠BMSC的体内成骨模型,阐明VEGF和BMP在骨形成过程中相互关系,是否存在协同效应,为进一步进行该方面的研究提供实验基础,同时也为BMP2及VEGF-165双基因共转染BMSC将来用于其他更广泛的基因治疗积累经验。总结如下: 1.VEGF-165和BMP2单基因及双基因共表达质粒的成功构建、鉴定。 2.BMSC在体外具有明确的成骨分化能力。 3.脂质体介导BMP2和VEGF-165双基因表达质粒转染体外培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)可有效表达。 4.VEGF独自不能诱导骨形成,但具有促进和提高BMP2诱导骨形成的作用。