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移植胚胎干细胞的衍生细胞治疗全横断脊髓损伤的实验研究

武明鑫  
【摘要】:本实验根据目前临床上脊髓损伤治疗的研究现状及干细胞实验研究的进展,应用直接诱导法在体外诱导分化携带Lac-z标记基因的小鼠胚胎干细胞,诱导得到具有神经前体细胞特性的衍生细胞,经免疫细胞化学方法验证后移植入脊髓全横断损伤的小鼠模型体内,应用形态学方法研究胚胎干细胞来源的衍生细胞移植后在脊髓损伤实验动物体内的存活、迁移和分化状况,并运用动物行为学方法观察细胞移植后的实验动物神经功能的恢复状况,以此来探讨胚胎干细胞的衍生细胞移植对脊髓损伤的治疗作用及机制。 我们在实验中发现,应用直接诱导法诱导胚胎干细胞,将其成功分化为具有神经前体细胞特性的衍生细胞,该方法较其它诱导方法简单实用。从实验结果看,小鼠胚胎干细胞株s8在含有小鼠白血病抑制因子(LIF)的培养液中具有自我增殖特性,保持多分化潜能;诱导分化的小鼠胚胎干细胞的衍生细胞成功表达神经前体细胞的特异性标志基因Nestin和神经元的特异性标志基因MAP-2,具有较强的分裂增殖能力及传代能力。移植的诱导小鼠胚胎干细胞的衍生细胞能在宿主体内长期存活、迁移并继续分化,从形态学角度研究证实胚胎干细胞来源的衍生细胞移植可修复受损的神经元及神经胶质细胞;应用动物行为学研究证明细胞移植后显著改善实验动物神经功能,促进运动功能的恢复。


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