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水疱性口炎病毒反向遗传重组载体的构建

孙兆增  
【摘要】:随着RNA病毒反向遗传技术的进展,水疱性口炎病毒(vesivular stomatitisvirus,VSV)载体已被开发成为一种有效的治疗制剂。VSV病毒载体是一种高效的溶瘤病毒载体,具有非常广的溶瘤范围。资料报道VSV载体几乎能够溶解所有的瘤细胞,在体外实验中VSV载体的溶瘤率都在50%以上,在体内实验中VSV载体能够显著延长荷瘤动物模型的寿命。VSV载体也被开发成为一种有效的疫苗载体, VSV作为疫苗载体应用到获得性免疫综合症病毒、流感病毒、丙型肝炎病毒和乙肝病毒等疫苗的研制过程中。因此水疱性口炎病毒载体具有非常好的应用前景。 本实验克隆了水疱性口炎病毒的全长cDNA序列(11161bp)以及L蛋白基因序列(6330bp)、N蛋白基因序列(1269bp)和P蛋白基因序列(798bp),并构建了水疱性口炎病毒的反向遗传重组系统,即:包含VSV全长cDNA序列的反向遗传重组载体和L蛋白、N蛋白和P蛋白的表达载体,并将这四种质粒共同转染BHK-21细胞,对VSV的反向遗传重组进行探索。这为水疱性口炎病毒载体的进一步应用打下基础。


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