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河豚毒素ELISA检测方法的优化与检测试剂盒的研发

孙广瑞  
【摘要】: 河豚毒素(Tetrodotoxin,TTX)是一种海洋生物毒素,分布广泛,不仅存在于河豚鱼中,其他一些海洋动物体内也有。TTX是一种强神经毒,其毒力比氰化钠大1000倍。 本课题所应用的ELISA检测方法是基于针对TTX的高效价单克隆抗体与抗原的高亲和力特异性结合而达到检测样品中的抗原的目的。通过分离小鼠腹水中分泌单克隆抗体杂交瘤细胞制备小鼠腹水。选用的是辛酸-硫酸铵联合沉淀法纯化腹水得到单克隆抗体。应用线性规划模型对ELISA检测方法进行了优化,并测定了优化后ELISA检测系统的系统参数,根据已经优化的河豚毒素ELISA检测方法,组装ELISA检测试剂盒并测定试剂盒的检测相关参数。 本试验所组装的试剂盒依据《药物临床试验质量管理规范》(2003年8月6日国家食品药品监督管理局局令第3号发布)已达到一期临床标准。


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