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旋毛虫与SP2/0骨髓瘤细胞间相关抗原的研究

张景芝  
【摘要】: 为深入研究旋毛虫抗肿瘤的机理,本试验首先利用ELISA方法初步确定了旋毛虫与SP2/0骨髓瘤细胞间存在相关抗原,并利用Western-bloting方法测得了相关抗原的分子量。运用离心超滤装置及透析等技术对相关抗原进行了分离,免疫组化SABC法对其进行了定位分析。在此基础上,还进行了相关抗原的体内和体外抗肿瘤实验,并利用双向电泳分离技术及串联质谱获得了相关抗原的具体氨基酸序列。 实验结果显示:旋毛虫与SP2/0骨髓瘤细胞间存在较强的免疫交叉反应;旋毛虫抗原与SP2/0骨髓瘤高免血清反应的分子量分别是:66.2、39、31、27kDa,其中33KDa抗原产生的免疫反应最强;免疫组化定位分析相关抗原为表面抗原;应用相关抗原免疫小鼠进行的体内抗肿瘤试验表明,实验组小鼠产生了特异的体液和细胞免疫应答,CD4+和CD8+等T淋巴细胞以及CD19+等B淋巴细胞均进行了有效增值。统计学分析表明,相关抗原抑瘤效果与佐剂对照组比较差异显著(P0.01),与旋毛虫活虫组比较差异不显著(P0.05)。氨基酸测序结果显示,旋毛虫与SP2/0骨髓瘤间存在的相关抗原是一种混合物,90%以上的成分是原肌球蛋白(TM),它是一个由284个氨基酸组成的绳状、酸性的保守蛋白。分子量为33.211kDa、等电点为4.64。 本试验首次以相关抗原为切入点研究旋毛虫抗肿瘤的机理,为生物抗肿瘤制剂的研究与开发提供了理论依据。


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