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人乳头瘤病毒中和抗体检测方法的确立

刘明  
【摘要】: 确立了一种可以检测HPV中和抗体有效性的方法。构建了58L1- pcDNA3.1和58L2- pcDNA3.1两种HPV58结构基因质粒;还构建了pgL3-pcDNA3.1(L3-3.1)和BPV包装信号连pβ-gal Promoter(βB)两种报告基因质粒。将HPV16和HPV58两种结构基因质粒分别与L3-3.1,βB,pβ-gal Promoter(β)三种报告基因质粒共转染293FT细胞,收获假病毒(PsV),通过Western blot检测可知HPV16和HPV58结构基因质粒得到了特异性表达。将包裹L3-3.1的两种PsV通过超速离心进行了纯化,与包裹β和βB质粒的另外四种PsV按照报告基因质粒检测方法的不同分别进行了假病毒的感染实验和肝素阻断实验,结果证明所有的HPV58 PsV均为阴性结果;对分别包裹β和βB质粒的HPV16 PsV的检测结果呈阳性,但有待于进一步验证;而包裹L3-3.1的PsV成功地感染了293FT细胞,其感染的检测值与感染的浓度梯度在线性范围内呈正比,并且肝素对其有明显的阻断作用。


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