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HP感染C57BL/6小鼠CD4~+辅助性T淋巴细胞反应分析及抗HP嗜酸乳杆菌对其影响的探讨

李宏宇  
【摘要】: HP感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的发生密切相关,根除HP可治疗或预防上述疾病已是医学界的共识。目前,根除HP的方法主要为联合应用抗生素,但HP对抗生素的耐药状况日益严重,且应用抗生素引起的抗生素相关性腹泻、肠道菌群失调甚至伪膜性肠炎等一系列问题使治疗者的依从性变差,这些问题成为HP根除治疗失败的主要原因之一,因此探讨HP的发病机制并制定合理的根除方案一直是该领域的研究热点。 T淋巴细胞在免疫调节中具有重要的作用,Th1/Th2比例的失衡是T细胞功能紊乱的重要指标。HP感染引起的T细胞反应究竟是以Th1为主还是以Th2为主目前研究还存在争议,机体表现为Th1或Th2反应可能对HP感染的发生发展和临床转归有重要意义。 近年来研究者发现嗜酸乳杆菌能有效抑制HP,甚至有研究表明单独应用嗜酸乳杆菌就能实现根除HP的目的。由于嗜酸乳杆菌是益生菌,故不增加人群耐药性,而由其制成的发酵乳制品属功能性食品也可使治疗依从性差的难题得以解决。基于上述热点问题本研究作了以下工作。 1、HP感染C57BL/6小鼠CD4~+辅助性T淋巴细胞反应分析。以C57BL/6小鼠为研究对象,用国际标准菌株HP SS1免疫实验动物,经病理组织学检查证实成功建立了HP感染动物模型,采用MTT法分析了HP感染C57BL/6小鼠脾脏淋巴细胞的增殖水平,结果表明以灌饲方法接种HP标准菌株SS1可诱导SPF级C57BL/6小鼠出现与人类相似的慢性胃黏膜损伤;HP感染C57BL/6小鼠脾脏淋巴细胞经非特异性抗原ConA和特异性HP抗原刺激后,其增殖能力均较非HP感染对照组明显增强。HP感染C57BL/6小鼠脾脏CD4~+ IFN-γ~+产生细胞明显高于CD4~+IL-4~+产生细胞,提示Th1介导的免疫反应在HP诱导的慢性炎症反应中起重要作用。 2、抗HP嗜酸乳杆菌预防和治疗HP感染对C57BL/6小鼠CD4~+辅助性T淋巴细胞反应的影响。采用本研究组前期工作中已经从健康人胃肠道中筛选到在体外具有明显拮抗HP作用的嗜酸乳杆菌L4进行预防和治疗C57BL/6小鼠的HP感染,结果表明预先给C57BL/6小鼠灌饲抗HP嗜酸乳杆菌可有效预防随后接种HP所致感染;接种HP后给予抗HP嗜酸乳杆菌可有效降低胃黏膜HP定植密度,并改善胃黏膜慢性炎症评分。预先给C57BL/6小鼠灌饲抗HP嗜酸乳杆菌对随后再接种HP所诱发的淋巴细胞增殖反应具有抑制作用,此外对Th1细胞因子产生水平也具有抑制作用;而接种HP后再给予抗HP嗜酸乳杆菌则对C57BL/6小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应无明显抑制作用,而且对Th1细胞因子产生水平也无明显抑制作用。 3、抗HP嗜酸乳杆菌发酵乳长期治疗对HP感染C57BL/6小鼠CD4~+辅助性T淋巴细胞反应的影响。以抗HP嗜酸乳杆菌为基础制成发酵乳,观察应用其长期治疗HP感染的效应,结果表明应用抗HP嗜酸乳杆菌(L4)发酵乳治疗HP感染C57BL/6小鼠,可以明显降低胃黏膜组织HP定植密度,并减轻胃黏膜病理损伤程度,长期治疗还可以根除HP。与普通发酵乳或单纯HP感染组比较,应用抗HP嗜酸乳杆菌(L4)发酵乳长期治疗HP感染C57BL/6小鼠,可明显抑制脾脏淋巴细胞增殖能力。与普通发酵乳或单纯HP感染组比较,应用抗HP嗜酸乳杆菌(L4)发酵乳长期治疗HP感染C57BL/6小鼠,可明显抑制脾脏CD4~+IFN-γ~+产生细胞水平。 总之,Th1介导的免疫反应在HP诱导的慢性炎症反应中起重要作用。本实验室筛选的抗HP嗜酸乳杆菌L4也可能通过Th1介导的免疫反应对HP感染起到良好的治疗和预防作用。


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