新城疫病毒TL1株全基因组序列特性分析及HN蛋白基因的促融合表达研究

【摘要】： 为探索新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的致病机理,尽而积极有效地防治该病的发生和流行,本研究首先对新城疫病毒TL1分离株进行了部分生物学特性鉴定,结果显示TL1为强毒株。在此基础上对TL1全基因组序列进行了测定和特性分析,发现TL1全基因组序列长度为15 192 nt。比clone 30、Herts/33等21个NDV毒株多6个碱基,多出的6个碱基的位置及组成随毒株的不同均有所不同,共有5种形式。通过对38个NDV全基因组同源性及遗传进化树分析,表明不同国家分离的毒株明显具有地区差异性,同时也说明NDV的演化是在整体水平上进行的,处在一个变异与保守的动态平衡中。通过对构建的TL1株NP、M、F及HN蛋白基因真核表达载体分别转染BHK-21细胞,利用间接免疫荧光试验证明构建的4个表达载体都可以在BHK-21细胞中成功表达。对含有NP、M、F蛋白基因的3个真核表达载体及含有NP、M、F、HN蛋白基因的4个真核表达载体分别共转染BHK-21细胞,证实HN蛋白基因可促进细胞的融合,发现两种组合表达后均可产生病毒样颗粒,M、NP、F和HN四个结构蛋白共表达所形成的病毒样粒子更接近于真实的新城疫病毒粒子。